Визначення бактеріального обсіменіння молока

Прилади і реактиви: стерильні пробірки з корками, стерильні піпетки 1 і 10 мл, редуктазник або водяна баня з термометром, 0,01 % водний розчин резузарину натрію.

Техніка роботи

1. В пробірку налити 10мл молока, нагрітого до 40° і 1мл. 0,01 % розчину резузарину.

2. Пробірку закрити корковою пробкою і повільно 3-4 рази перевернути, не допускаючи струшування.

3. Поставити пробірку у закритий редуктазник чи водяну баню з температурою води 37,1-37,5^ОС.

4. Через 20 хвилин або 1 годину спостерігати за зміною кольору вмісту пробірки.

Користуючись таблицею, визначити клас бактеріального обсіменіння молока.

Таблиця 5.1 – Визначення класності молока пробою з резазурином.

Фактори, які впливають на точність визначення.

1. Неправильно приготовлений розчин, метиленового голубого.

2. Низька температура в водяній бані.

3. Брудні пробірки.

4. Нещільно закриті пробірки.

Визначення кількості соматичних клітин в молоці

Візуальний метод визначення кількості соматичних клітин в молоці

В луночку пластинки ПМК-1 вносять 1мл добре перемішаного молока і добавляють 1мл водного розчину «Мастоприм», суміш інтенсивно перемішують скляною паличкою 10с, піднімаючи суміш вверх на 50-70мм і після чого на протязі не більше к 60с оцінюють результати аналізу.

Кількість соматичних клітин встановлюють по консистенції молока:

Виявлення сторонніх домішок в молоці

Визначення соди в молоці

Для зниження кислотності та для забезпечення молока від скисання до нього додають соду. Нейтралізоване содою молоко швидко псується, тому що лишається бактерицидних властивостей а замість яких у ньому розмножуються гнилісні бактерії з створенням шкідливих речовин. Виявити соду можливо наступним методом.

Прилади і реактиви: штатив, пробірки, бромтимоловий голубий 0,01% спиртовий розчин, піпетки, крапельниця.

Техніка роботи

В суху пробірку наливають 5мл досліджуваного молока і обережно по стінці додають 7-8 крапель (0,1мл) розчину бромтимолового голубого. Через 10хв. спостерігають за зміною забарвлення кільцевого шару.

Жовте забарвлення кільцевого шару вказує на відсутність соди в молоці. Поява зеленого кольору різних відтінків - наявність соди в молоці.

Виявлення крохмалю і муки в молоці

Крохмаль або муку додають до молока для підвищення його в'язкості (густини). Виявлення їх основане на реакції йоду з крохмалем, який забарвлюється вія дії йоду в синій колір.

Прилади і реактиви: пробірки, піпетки на 5мл, крапельниця 0,5% розчин йоду.

Техніка роботи

1. В пробірках змітати по 5мл молока різних проб ї 3 краплі спиртового розчину йоду.

2. Встановити зміну забарвлення - при наявності крохмалю молоко забарвлюється в синій колір, без крохмалю в блідо-жовтий.

Визначення в молоці перекису водню

Прилади і реактиви: піпетки 1мл, пробірки, розчин сірчаної кислоти, крохмальний розчин йодистого калію.

Підготовка до дослідження:

1. Приготування розчину сірчаної кислоти. 1 об’ємну частину сірчаної кислоти змішують в стакані з 3 об’ємними частинами води.

2. Приготування крохмального розчину йодистого калію. Наважку крохмалю масою 3г розчиняють в 20мл води і приливають до 80мл киплячої води. Після охолодження до крохмального розчину додають 3 і йодистого калію, розчиненого в 5-10мл дистильованої води. Зберігати розчин потрібно в темному місці не більше 5 днів.

Техніка роботи

1. В пробірку наливають 1мл досліджуваного молока, додають дві краплі розчину сірчаної кислоти і 0,2 крохмального розчину йодистого калію. Через 10хв. спостерігають за зміною кольору розчину в пробірці. Поява окремих плям синього кольору свідчить про присутність перекисі водню в молоці.

Визначення аміаку в молоці

Прилади і реактиви: термометри ртуті лабораторні, циліндра мірні об'ємом 25 і 50мл, пробірки, пінетки 1-2мл, реактив Неслера, оцтова кислота (10% розчин), стакани скляні.

Підготовка до дослідження:

1. Вміст аміаку в молоці визначають не раніше, ніж через 2 год. після доїння. В склянку відміряють 20мл молока і нагрівають впродовж 2-3 хвилин на водяній бані при температурі 40-50°С. В підігріте молоко вносять 1мл 10% оцтової кислоти. Для осадження казеїну суміш залишають на 10хв. Техніка визначення:

2. Піпеткою відбирають 2мл сироватки, яка відстоялася, і переносять в пробірку. В цю ж пробірку додають 1мл реактиву Неслера і вміст перемішують, спостерігаючи при цьому впродовж 1хв. за зміною кольору суміші. Поява лимонно-жовтого забарвлення суміші вказує на присутність аміаку, характерного для молока. Поява оранжевого кольору різної інтенсивності вказує на наявність аміаку вище норми.

Визначення інгібіторів в молоці

Прилади і реактиви: редуктазник, термометр, сигнальний годинник, піпетка на 1 і 10мл 0,05% розчину резузарину.

Техніка роботи

1. У дві пробірки внести по 10мл досліджуваних проб молока, закрити ватними корками і прогріти на водяній бані при температурі 85-90°С, впродовж 5 хвилин.

2. Охолодити проби до 45°С і внести в кожну пробірку по 0,5мл 16-18 год. культури термофільного стрептокока, приготовленої попередньо на знежиреному молоці звичайним способом.

3. Пробірки з молоком і внесеною культурою струснути і помістити в редуктазник при температурі 40-42°С на 1,5 год.

4. Після цього в кожну пробірку швидко додати по 1мл 0,05% розчину резазурину, струснути і знову помістити в редуктазник при температурі 40-42°С на 10 хв.

5. Відмітити зміну кольору. Збереження початкового кольору або незначна його зміна (до бузкового) свідчить про затримання розвитку у досліджуваному молоці культури термофільного стрептокока і, отже, про наявність у зразку інгібіторів. При відсутності інгібіторів початковий колір змінюється до рожевого або перетвориться в білий.

Для звучності оцінки результатів дослідження можна використати таблицю.

Цей метод дозволяє визначити наявність в молоці пеніциліну В кількості від 0,001 до 0,02 од-мл і вище, стрептоміцину від 0,005- 2,0 од-мл і вище.