Визначення загальної кількості білку і казеїну

Методом формольного титрування

Визначити в індивідуальній пробі загальної вмісту білку та вмісту казеїну по результатам двох, трьох паралельних титрувань молока корів аналогів, різних порід або генотипів

Прилади і реактиви: піпетки на 2 і 10мл, конічні колби на 100-200мл, бюретка, 1% розчин фенолфталеїну, 0,1н. розчин NаОН, 30-40% нейтралізований формалін, (в колбу відміряти 10мл молока, 20мл води і 1мл 2,5% розчину сірчанокислого кобальту. Еталон придатний для роботи впродовж однієї зміни. Для більш тривалого зберігання еталону до нього додати одну краплю формаліну).

Техніка роботи

1. В колбу відміряти 10 мл молока і 0,5 мл (10-12 крапель) і 1% спиртового розчину фенолфталеїну. Суміш відтитрувати 0.1н.NаОН до слаборожевого забарвлення, яке не зникає при збовтуванні і відповідає еталону.

2. Далі в колбу додати 2 мл нейтралізованого 40% (свіжоприготованого) формаліну і друге відтитрувати 0,1н.лугом до появи рожевого забарвлення такої ж інтенсивності, як і при першому титруванні.

3. Кількість мл 0,1н. лугу, витрачено на титрування після додавання формаліну, помножити на коефіцієнт 1,94. Одержане число - дає процентний вміст білку в молоці.

Якщо цю ж кількість лугу помножити на коефіцієнт 1,51, то одержують процентний вміст казеїну в молоці.

Білкові речовини в молоці представлені казеїном, альбуміном і глобуліном. Середні вміст їх складає 3,3%, з них казеїну - 2,7, альбуміну - 0,5, глобуліну - 0,1%.

Фактори, які впливають на точність аналізу

1. Неоднакова інтенсивність забарвлення при титруванні.

2. Якість і точність внесеного формаліну. Використовують тільки свіжо-приготований нейтральний формалін.

3. Молоко з підвищеною кислотністю дає завищені результати.

Визначення властивостей білків.

Виділення казеїну кислотою, альбуміну і глобуліну нагріванням

Прилади і реактиви: мірний циліндр на 100мл, конічна колба на 100-200 мл, піпетки на 5 і 10мл, лійка з фільтром, пробірки, бюретка, 5% розчин оцтової кислоти.

Техніка роботи

1. В колбу відміряти 100мл молока і 50мл дистильованої води, В одержану суміш краплями із бюретки додавати розчин оцтової кислоти до появи згустків казеїну.

2. Осад казеїну відфільтрувати. У прозорому фільтрі залишаться розчинні азотисті сполуки, в тому числі альбуміни і глобуліни.

3. 5мл прозорого фільтрату прокип'ятити в пробірці. Спостерігати появу муті, а далі коагуляцію альбуміну і глобуліну. Наявність цих білків свідчить про відсутність пастеризації молока.

Проведення сичужної проби.

Прилади і реактиви: пробірки, піпетки на 1 і 10мл, термометр, водяна баня. 1% розчин сичужного ферменту.

Техніка роботи

1. В три пробірки відміряти піпеткою по 10мл розмішаного молока.

2. Пробірки з молоком поставити у водяну баню при 32°С, в одну з пробірок помістити термометр, по якому слідкувати за температурою води. Довести температуру молока до 32°С і після того у дві пробірки внести по 1 мл розбавленого у 25 разів розчину сичужного ферменту, температура якого 32°. Вміст пробірок швидко перемішати і поставити їх у водяну баню, зафіксувати по секундоміру час.

3. Встановити фазу коагуляції - проміжок часу від моменту введення сичужного ферменту до появи пластівців білка. Для виявлення пластівців час від часу скляною паличкою наносять на стінки пробірки краплю молока. При стіканні по стінці краплі молока легко виявити пластівці білка.

4. Встановити фазу гелеутворення – проміжок часу від моменту появи пластівців до утворення щільного згустку. Для цього беруть пробірку, яку не використовували для встановлення фази коагуляції, час від часу її нахиляють і слідкують за утворенням згустку. Кінцем фази гелеутворення вважають момент, коли при нахилі пробірки поверхня згустку незначно деформується.

5. Визначити тривалість зсідання молока - час з моменту введення фермент} до утворення щільного згустку (фаза коагуляції + фаза гелеутворення).

За сиропридатністю молоко ділять на три групи:

1 групи – молоко, яке осідає впродовж 15 хвилин;

ІІ групи - від 16 до 40хв.;

III групи - більше 40хв.

ПРИКЛАД:

Завдання

1. Визначити вміст білків і молочного цукру в пробах молока на аналізаторі АМ-2.

2. Визначити вміст білків і молочного цукру в пробах молока методом формольного титрування.

3. Визначення властивостей білків проведенням сичужної проби.

4. Виділити казеїн кислотою, альбумін і глобулін нагріванням

ЛАБОРАТОРНА РОБОТА №5

Тема: Контроль санітарно-гігієнічного стану молока. Димастинова проба

Визначення чистоти молока.

Прилади і устаткування: прилад для визначення чистоти молока, фільтрувальні кружки, еталон.

Техніка роботи.

1. Нагріти молоко до 36-40°С, щоб розчинити грудочки вершків які затримуються на фільтрі і маскують наявність механічних домішок.

2. На металічну сітку приладу покласти фільтрувальний кружок, зафіксувати його за допомогою пружини.

3. 250мл. молока старанно перемішати і швидко, не даючи механічним домішкам осісти, вилити у прилад по стінці, щоб не пошкодити фільтрувальний кружок Після закінчення фільтрування молока фільтр покласти на аркуш пергаментного паперу і просушити на повітрі, не допускаючи попадання пилу.

4. Фільтрувальний кружок порівняти з еталоном, встановити групу чистоти молока і приклеїти кружок у лабораторний зошит.

5. При наявності великої кількості механічних домішок молоко рахується недоброякісним, бо разом з механічними частинами в нього попадають мікроорганізми.

Фактори, які впливають на точність аналізу

1. Не точно відмірена кількість молока.

2. Діаметр фільтрувальної поверхні приладу більший або менший.

Вирішити проблемну ситуацію

З однієї ферми поступило молоко з наступними показниками:

Ø Густина -1,030г/см³; кислотність -18°Т; температура -10°С; консистенція тягуча. Що робити з такою партією молока?

Ø Визначити густину молока, якщо відомі показники ареометра і температура молока.

Рис. 5.1 - Еталон для визначення групи чистоти молока