Экзаменационный билет № 70.

ОБЩАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ
1. Молекулярные основы репродукции вирусов. Репродукция ДНК- содержащих вирусов.

Первая стадия вируной инфекции-адсорбция вириона на клетке.У оболочечных вирусов есть шипы-рецепторы. У безоболочечных рецепторную функцию вып-т белки капсида. То есть вирусы поражают клетки избирательно. После адсорбции вирус проникает внутрь(эндоцитозом либо с помощью белка слияния,который открывает вирусу путь в мембране). Дальше происходит раздевание вируса. Далее ДНК-содержвирусы транскрибируются в ядре клетки с пом клеточной РНК –полимеразы,в рез чего обра-ся иРНК,которая транслируется с образование белков вируса. Особенноть этого процесса явл-ся синтез иРНК в ядре с пом клеточной РНК-полимеразы(аденовирусы,ВПЧ) или с пом собственной РНК-полимеразы(поксивирусы).

 То есть геномная ДНК вируса-)транскрипция иРНК-)трансляция белка вируса

Репликация вирусных геномов,те накопление копий вирусных геномов отличается у однонитевых и двунитевых ДНКсод вирусов.

Двунитевые ДНКвирусы. К ним относятся вирус герпеса н-р. Репликация идет с пом вирусной или клеточной ДНК-полимеразы. Они реплицируются обычным полуконсервативным методом. У большинства это идет в ядре.

Однонитевые ДНКвирусы –это парвовирусы используют клеточную ДНК-полимеразу для оздания двунитевого генома. На плюс-ДНК нити комплементарно синтезируется минус-нить,которая будет служить для синтеза плюс-нити днк нового вириона. Паралельно синтез-ся иРНК и идет трансляция вирусных пептидов.

После в цитоплазме идет сборка вирионов. Образуется нуклеокапид, а если есть нуждна при проходе через цитоплазму клетки и суперкапсид. Продолжительность вирусной репродукции идет 6-8 ч и заканчивается выходов вируса из клетки(взрывной путь.когда из клетки разом выходит большое кол-во вирионов или почкованием присуще сложным вирусам) При проходе через мембрану образуется почка,которая потом отделяется. Вирусы,формир в ядре клетки почкуются через ядерную мембрану и обретают липопротеидную оболочку

ИММУНОЛОГИЯ 3,4
Иммуноглобулины. Антитела

Антитела- специфические эффекторы гуморального иммунитета.

Биохим и клеточная природа антител:

1)крупные гликопротеины

2)белки плазмы крови, участвующие в ИО-иммуноглобулины

3) при электрофорезе АТ мигрируют в основном с фракцией гаммаглобулинов

Клеточная природа антител:

Продуцируются плазматическими кл- потомками клона специфических В-лимфоцитов, котрые контактировали с соотв антигеном

Специфичность АТ: конкретный Ig способен связываться с АГ, вызвавшим его образование.

Антитела имеют форму буквы Y: каждая структурная единица-домен; с антигеном взаимодействуют вариабельные домены.

Большинство молекул иммуноглобулинов составлено из двух тяжелых (H) цепей и двух легких (L) цепей, соединенных дисульфидными связями. Легкие цепи состоят или из двух k-цепей, или из двух l-цепей. Тяжелые цепи могут быть одного из пяти классов (IgA, IgG, IgM, IgD и IgE).

Каждая цепь имеет два участка:

1) постоянный. Остается постоянным в последовательности аминокислот и антигенности в пределах данного класса иммуноглобулинов;

2) вариабельный. Характеризуется большой непостоянностью последовательности аминокислот; в этой части цепи происходит реакция соединения с антигеном.

Каждая молекула IgG состоит из двух соединенных цепей, концы которых формируют два антигенсвязывающих участка. На вариабельном участке каждой цепи имеются гипервариабельные участки: три в легких цепях и четыре в тяжелых. Разновидности последовательности аминокислот в этих гипервариабельных участках определяют специфичность антитела. При определенных условиях эти гипервариабельные области могут также выступать в роли антигенов (идиотипов).

Понятия об аллотипах, идиотипах.

Аллотипантител определяется константными доменами и каркасными участками вариабельных доменов H и L цепей.

Идиотипопред-ся структурным своеобразием вариабельных доменов, формирующих паратоп.

Динамика антител в ходе первичного и вторичного ИО:

После поступления чужеродного АГ в организм через несколько дней начинают появляться антитела плазмы крови. В процессе инфекционного заболевания концентрация антител увеличивается. Приблизительно через 3 дня появляются IgM, затем в небольшом кол-ве IgG.

Реакция на первый и повторный контакт отличаются.

2. Клетки, синтезирующие антитела:
1. В-лимфоциты. 2. Т-лимфоциты. 3. Плазмоциты. 4. Макрофаги. 5.Нейтрофилы.

Клеточная природа антител:

Продуцируются плазматическими клетками- потомками клона специфических В-лимфоцитов, которые контактировали с соотв антигеном.

БАКТЕРИОЛОГИЯ
3. Положения, справедливые для ретикулярных тел хламидий:
1. Репродуктивная (вегетативная) форма хламидий. 2. Метаболическая инертность. 3. Способность к делению. 4. Трансформация в элементарные тела.5. Устойчивость во внешней среде.

Таксономия: порядок Chlamydiales, семейство Chlamydaceae, род Chlamydia. Род представлен видами С.trachomatis, C.psittaci,C.pneumoniae.
Болезни, вызываемые хламидиями, называют хламидиозами. Заболевания, вызываемые C. trachomatisuC. pneumoniae, — антропонозы. Орнитоз, возбудителем которого являет­ся С. psittaci, — зооантропонозная инфекция.
Морфология хламидий: мелкие, грам «-» бактерии, шаровидной формы. Не образуют спор, нет жгутиков и капсулы. Клеточная стенка: 2-х слойная мембрана. Имеют гликолипиды. По Граму – красный цвет. Основной метод окраски – по Романовскому – Гимзе.
2 формы существования: элементарные тельца (неактивные инфекционные частицы, вне клетки); ретикулярные тельца (внутри клеток, вегетативная форма).
Культивирование:Можно размножать только в живых клетках. В желточном мешке развивающихся куриных эмбрионов, организ­ме чувствительных животных и в культуре кле­ток
Ферментативная активность: небольшая. Ферментируют пировиноградную кис­лоту, синтезируют липиды. Не способны синтезировать высокоэнергетические соединения.
Антигенная структура: Ан­тигены трех типов: родоспецифический термостабильный липополисахарид (в клеточной стенке). Выявля­ют с помощью РСК; видоспецифический антиген белковой природы (в наружной мембране). Обнаруживают с помощью РИФ; вариантоспецифический антиген белко­вой природы.
Факторы патогенности.С белками наружной мембраны хламидий связаны их адгезивные свойства. Эти адгезины обнаруживают только у элементарных телец. Хламидии образуют эндотоксин. У некоторых хламидий обна­ружен белок теплового шока, способный вызывать аутоиммунные реакции.
Резистентность.Высокаяк различным факторам внешней среды. Устойчивы к низким температурам, высушиванию. Чувствительны к нагреванию.
С. trachomatis - возбудитель забо­леваний мочеполовой системы, глаз и респи­раторного тракта человека.

Особенность всех хламидий - сложный цикл размножения. В нем участвуют две формы микроорганизма - элементарные тельца и ретикулярные тельца . Элементарные тельца, способные к внеклеточному существованию, передаются от человека к человеку. Они прикрепляются к клеткам макроорганизма (обычно к цилиндрическому или переходному эпителию) и проникают внутрь них путем эндоцитоза. Через 8 ч элементарные тельца превращаются в ретикулярные тельца . Это та форма микроорганизма, которая паразитирует в клетке и размножается.Ретикулярные тельца делятся, образуя множество особей. Все они располагаются внутри вакуоли , занимающей большую часть зараженной клетки. Микроколониихламидий внутри вакуолей известны как " хламидийные включения ". Вакуоли не сливаются с лизосомами вплоть до последней стадии цикла размножения. Спустя 24 ч ретикулярные тельцаначинают уплотняться, окружаясь клеточной стенкой, и превращаются в элементарные тельца. Затем вакуоль разрывается, элементарные тельца освобождаются из зараженной клетки и проникают в соседние.

ВИРУСОЛОГИЯ
4. Основная патогенетически значимая мишень для ВИЧ:
1. Макрофаги. 2. Дендритные клетки. 3. CD8 Т-лимфоциты. 4. CD4 Т-лимфоциты. 5. В-лимфоциты. 6. Плазматические клетки.

Молекулярная мишень CD4 –имеет сродство к белку gp120. Клеточный рецептор определяет избирательность.

Структура

ВИЧ относится к семейству ретровирусов.

Вирион имеет сферическую форму, диаметром 100–150 нм. Кубический тип симметрии. Наружная (суперкапсидная) оболочка вируса состоит из бимолекулярного слоя липидов, который имеет происхождение из клеточной мембраны клетки хозяина. Из нее выступают шипы двух типов:

1) gp 120 (обладает рецепторной функцией);

2) gp 41 (обладает якорной функцией).

В эту мембрану встроены рецепторные образования. Под наружной оболочкой располагается сердцевина вируса (кор), которая имеет форму усеченного конуса. Промежуток между наружной вирусной мембраной и сердцевиной вируса заполнен матриксным белком. Внутри сердцевины располагаются две одинаковые молекулы вирусной РНК, связанные с низкомолекулярными белками р6 и р7.

Каждая молекула РНК содержит девять генов ВИЧ:

1) структурные (три гена);

2) регуляторные (три гена, они не кодируют структурных компонентов вируса, но, попав в клетку, кодируют образование веществ, которые либо угнетают активность структурных генов, либо активируют);

3) дополнительные (три гена, они содержат информацию, необходимую для продукции белков, которые управляют способностью вируса инфицировать клетку, реплицироваться и вызывать заболевание).

Выделяют три группы структурных генов:

1) gag (кодируют образование структурных белков сердцевины вируса);

2) pol (направляют синтез белков – вирусных ферментов);

3) ent (кодируют синтез оболочечных белков gp 120 и gp 41).

Концы каждой молекулы РНК содержат дублированную последовательность РНК. Эти участки действуют как переключатели для управления процессом вирусной транскрипции, взаимодействуя с белками ВИЧ или белками клетки хозяина.

Кроме РНК, там же находятся вирусные ферменты:

1) обратная транскриптаза; осуществляет синтез вирусной ДНК с молекулы вирусной РНК;

2) протеаза; участвует в «нарезании» предшественников вирусных белков при созревании новой вирусной частицы;

3) эндонуклеаза (интеграза); производит встраивание вирусной ДНК в геном клетки хозяина, в результате чего образуется провирус.

Антигенными свойствами обладают:

1) белки сердцевины;

2) оболочечные гликопротеины. Характеризуются высоким уровнем антигенной изменчивости, который определяется высокой скоростью замен нуклеотидов.

Интенсивная антигенная изменчивость ВИЧ происходит в организме больных в ходе инфекции и у вирусоносителей. Она дает возможность вирусу «скрыться» от специфических антител и факторов клеточного иммунитета, что приводит к хронизации инфекции.

В обычных культурах клеток ВИЧ не культивируется. Для культивирования используется культура Т-лимфоцитов с хелперной функцией.