Методика перегонки с водяным паром.

Подкисление проводят щавелевой или винной кислотами. 100г внутр. органов измельчают, смешивают с Н₂О до кашицеобразной массы и помещают в круглодонную колбу. Подкисляют до рН 2-2,5 щавелевой к-той. Присоед-т парообр-ль к колбе с биоматериалом.

Первую порцию дистиллята собирают в колбу, содержащую 2-5% р-р NaOH и иссл-т на наличие HCN. Второй и третий дистилляты соб-т в приемник без щелочи в кол-ве по 25 мл.

В-ва основного и нейтр. характера перегоняют из подщелоч. биоматериала. Дистиллят собирают в 0,1 М р-р НСl. По окончании перегонки разъединить парообр-ль и колбу для перегонки, прекратить нагревать.

HCN: подкисление щавелевой или винной к-тами, дистиллят соб-т в NaOH.

CH₃COOH:подкисл. H₂SO₄ или H₃PO₄, дистиллят соб-т в р-р NaOH.

Этиленгликоль: в колбу с биоматериалом добавляют бензол (переносчик) и перегонку проводят в аппарате с насадкой.

CH₃OH: приемник охлаждают, чтобы избежать потерь метанола.

ТЭС: из внутр. органов изолируют перегонкой с водяным паром и соб-т в спирт. р-р иода; из раст. обьектов экстраг-т хлороформом и экстракт смешивают с кристаллическим иодом.

Схема исследования дистиллята на наличие «летучих» ядов.

Способы концентрирования и очистки дистиллята.

1. Экстракция орг. р-лями (диэтиловый эфир, СНСl₃). Так конц-т изоамиловый спирт, анилин, фенол, крезолы.

Экстрагируя изоамиловый спирт эфиром, одновр-но проводят и очистку его от воды, т.к. р-цию на изоамиловый спирт проводят в отсутствии воды. Этиленгликоль из крови и мочи извлекают ацетоном, который затем испаряют. Такой способ позволяет увеличить конц-цию этиленгликоля по сравнению с исх-й при исследовании крови в 5-10 раз, мочи – 25-50 раз.

2. Фракционная (дробная) перегонка проводится в колбах с дефлегма-торами. Получаются фракции с близкими Ткип.

3. При изолировании этиленгликоля в колбу с биоматериалом приб-т бензол в качестве переносчика. Прибор имеет специальную насадку.

Схема исследования дистиллята химическим методом.Первый дистиллят иссл-т на наличие цианид-ионов. Наиболее доказательной явл-ся реакция образования берлинской лазури. Это высокочувствительная и избирательная р-ция, др. р-ции имеют вспомогат. значение.

Со вторым дистиллятом проводят исследование на:

1. Формальдегид – р-ция с фуксинсернистой или хромотроп. к-тами, при положит. рез-те р-ции – р-ция с реакт. Фелинга и р-ция восстан-ния Ag⁺.

2. Метанол – при отсутствии HCOH метанол окисляют до формальдегида (р-р K₂Cr₂O₇ в H⁺), а затем проводят перечисл. р-ции на формальдегид. При обнаруж. формальдегида на метанол проводят только р-цию обр-ния метилсалицилата или опред-т метанол методом ГЖХ.

3. Алкилгалогениды: выполн-ся р-ция отщепления органич. связ. хлора (пров-ся после гидролиза этанольным р-ром NaOH). При положит. р-ции на Cl^- проводят внутригруп. идент-цию алкилгалогенидов: р-ция обр-ния изонитрила; р-ция с резорцином; р-ция с реакт. Фелинга. При положит. р-ции отщепления органически связ. хлора и отриц-х р-циях (а, б, в) проводят спец. иссл-вание на дихлорэтан: р-ция переведения ДХЭ в этиленгликоль с послед. окислением его до формальдегида, на кот. проводят р-ции с фуксинсернистой или хромотроповой кислотами; вторая характерная р-ция на ДХЭ – образование ацетиленида меди, имеющего красную окраску.

Остаток второго дистиллята смеш-т с третьим и проводят р-ции на алкилгалогениды, т.е. при положит. предварит. р-циях проводится внутригруп. идентификация алкилгалог-дов.

При анализе дистиллята на фенолы и изоамиловый спирт дистиллят подщелачивают р-ром NaHCO₃ и извлекают эфиром.

Эфирные экстракты соед-т, фильтруют, удаляют эфир и проводят исследование на фенолы и изоамиловый спирт. На фенолы проводят предварит. р-цию обр-ния трибромфенола. Эта р-кция более чувств-на, чем р-ция с FeCl₃, и имеет отрицат. судебно-хим. значение. Если эта р-ция положит., то на фенолы проводят доп. р-ции (с хлоридом железа, образование индофенола).