Определение групповой и резус-принадлежности крови

В эритроцитах человека находятся агглютиногены, которые обозначаются буквами А и В. В сыворотке крови имеются антитела, которые называют агглютининами, их обозначают а и в. Агглютинины могут вступать в реакцию с одноименными агглютиногенами (А и а), (В и в), в результате чего происходит их склеивание (агглютинация) с последующим растворением (гемолиз). В зависимости от наличия или отсутствия того или иного агглютиногена и агглютинина выделяют четыре группы крови:

1) первая группа 0 (I): в эритроцитах нет агглютиногенов, в сыворотке агглютинины А и В;

2) вторая группа А (II): в эритроцитах агглютиноген А, в сыворотке агглютинин В;

3) третья группа В (III): в эритроцитах агглютиноген В, в сыворотке агглютинин А;

4) четвертая группа АВ (IV): в эритроцитах агглютиногены А и В, в сыворотке нет агглютининов.

Для определения группы крови применяют стандартные сыворотки, которые имеют маркировку с указанием названия, № серии, срока годности и титра (степени разведения). Сыворотки выпускают различной окраски: 0 (I) — желтого цвета, А (II) — синего, В (III) — красного цвета.

В соответствии с обозначениями групп крови на белую фарфоровую тарелку, разделенную на 4 части с указанием групп крови, пипеткой наносят по одной капле стандартной сыворотки I—III групп одной серии, отступив 3—4 см — сыворотки групп крови другой серии. Кровь для исследования берут из пальца, который тщательно обрабатывают. Исследуемую кровь наносят в центр тарелки. Затем сухими стеклянными палочками последовательно переносят капли крови (каждая в 10 раз меньше количества сыворотки) к сыворотке и тщательно их перемешивают. Следует помнить, что каждую каплю сыворотки и крови нужно перемешивать новой сухой и чистой палочкой. Тарелку периодически покачивают. Результат оценивают через 5 мин, хотя агглютинация может начаться уже через 30 с. В той капле сыворотки и крови, где произойдет агглютинация эритроцитов, появляются хорошо видимые красные глыбки и зернышки; там, где агглютинации не происходит, капля крови и сыворотки равномерно окрашена в розовый цвет.

Определение группы крови следует проводить при температуре 15—20°С. Агглютинация иногда бывает ложной. Для ее исключения в каждую каплю сыворотки добавляют каплю изотонического раствора хлорида натрия и продолжают наблюдение при периодическом покачивании тарелки до истечения 5 мин.

При оценке результатов исследования сначала сравнивают результаты реакции в каплях с сыворотками одной и той же группы серий. Они должны быть одинаковыми.

Различают следующие комбинации результатов:

1 — если сыворотки всех трех групп дали отрицательную реакцию (т.е. все капли остались равномерно окрашенными, без признаков агглютинации), то исследуемая кровь не содержит агглютиногенов в I группе;

2 — если агглютинация произошла в сыворотках групп I и III, а в сыворотке группы II остается равномерное окрашивание, то кровь содержит агглютиноген А и принадлежит ко II группе;

3 — если агглютинация произошла в сыворотке крови групп I и II, а в сыворотке группы III остается равномерное окрашивание, то эта кровь содержит агглютиноген В и относится к III группе;

4 — если агглютинация произошла во всех трех сыворотках, исследуемая кровь содержит агглютиногены А и В, т.е. относится к IV группе; необходимо для контроля провести дополнительное исследование со стандартной сывороткой группы IV.

Установлено, что у большинства людей в эритроцитах содержится резус-фактор. Их кровь называют резус-положительной (Rh+). Следует помнить, что людям с резус-отрицательной (Rh–) кровью можно переливать только резус-отрицательную кровь.

Определение резус-принадлежности можно проводить с использованием универсальной сыворотки антирезус и контрольной сыворотки. Кровь для исследования берется из пальца одновременно с определением групповой принадлежности. На фарфоровой белой тарелке делают разметку с обозначением контрольной (К) и антирезус (А) сыворотки. В соответствии с маркировкой наносят по одной капле (0,1 мл) сывороток. Рядом с ними помещают по одной капле (в 2 раза меньше капли сыворотки) исследуемой крови и перемешивают отдельными стеклянными палочками. Тарелку периодически покачивают.

Через 3—4 мин в обе капли добавляют по 1 капле изотонического раствора хлорида натрия для предупреждения ложной агглютинации и продолжают наблюдение до истечения 5 мин:

1) если в капле с сывороткой антирезус имеется агглютинация, а в контрольной ее нет, то исследуемая кровь резус-положительная;

2) при отсутствии агглютинации в обеих каплях исследуемая кровь — резус-отрицательная.

Если наступила агглютинация в контрольной сыворотке, то необходимо повторное исследование крови в условиях лаборатории.

Перед переливанием крови, кроме определения групповой и резус-принадлежности, проводят пробы на индивидуальную и биологическую совместимость:

1) проба на индивидуальную совместимость: в чашку Петри вносят 2 капли сыворотки крови больного и малую каплю (0,1 мл) крови донора и тщательно перемешивают. Чашку ставят на водяную баню (40—42°C) на 10 мин. Если агглютинации нет, то кровь индивидуально совместима;

2) биологическая проба: в/в струйно вводят 25 мл крови, системы перекрывают на 10 мин и вводят кровезаменители. Если нет признаков несовместимости (беспокойство, затрудненность дыхания, чувство давления, боли в пояснице и животе, озноб, учащение пульса и дыхания, снижение АД), то еще дважды проводят подобную пробу и затем выполняют трансфузию до конца.

Переливание крови может быть:

1) прямое переливание: кровь донора в неизмененном виде при помощи специальных аппаратов переливают реципиенту;

2) непрямое переливание: используется консервированная кровь.

Пути переливания при непрямом методе:

1) внутривенно: можно переливать капельно и струйно. Струйно лучше переливать в подключичную вену;

2) внутрикостно: капельно в губчатое вещество костной ткани (крыло подвздошной кости, грудина);

3) внутриартериально: нагнетание крови производят путем повышения давления во флаконе с кровью за счет соединения длинной иглы флакона с резиновой грушей тонометра; чаще используют лучевую артерию.

Для определения пригодности к переливанию отстоявшейся крови необходимо исключить наличие в ней гемолиза:

1) в две пробирки наливают по 10 мл дистиллированной воды, в одну из них вносят 2 капли исследуемой крови и встряхивают. Если цвет воды остается одинаковым в обеих пробирках — явного гемолиза нет;

2) для определения скрытого гемолиза кровь отливают в пробирку и центрифугируют. Окрашивание плазмы после центрифугирования в розовый цвет говорит о наличии скрытого гемолиза (доброкачественная кровь имеет прозрачную плазму и равномерный слой осевшей массы, граница между ними четко выражена).

Хранящуюся кровь ежедневно просматривают с целью выявления возможных изменений. При появлении хлопьев, сгустков, розового окрашивания плазмы, а также по истечении срока хранения (10—21 день) кровь не годна к переливанию.

Существующие заменители крови можно разделить на две группы:

1) естественные заменители, являющиеся препаратами человеческой крови (нативная и сухая плазма и сыворотка крови, альбумин сыворотки крови человека);

2) искусственные плазмозаменяющие средства.

Для переливания крови и кровезаменителей возможно использование одно- и многоразовых систем.

Прежде всего необходимо убедиться в целости упаковки, сроке сохранности, стерильности системы для трансфузии. Проверяют исправность фиксаторов для флакона. С флакона снимают наружные металлические диски пробок, дважды обрабатывают йодом. Флакон укрепляют в штативе.

Руки обрабатывают как для обычной хирургической операции. Во время переливания крови следят за тем, чтобы воздух не попал в вену.

Первые 4—6 ч после переливания крови или кровезаменителей необходим строгий постельный режим. Наблюдение включает измерение температуры тела, АД, частоты пульса и дыхания каждый час с обязательной их регистрацией. Тщательно измеряется количество принятой жидкости и выделенной мочи. После каждого переливания на следующий день необходимо делать анализы крови и мочи.

Кровезамещающие жидкости делятся на:

1) гемодинамические (противошоковые): полиглюкин быстро увеличивает объем циркулирующей крови или же предупреждает его снижение; реополиглюкин нормализует нарушение микроциркуляции; желатиноль применяют при шоке, гнойно-септических осложнениях; при переливании этих жидкостей возможны осложнения (тахикардия, снижение АД, гиперемия лица), прекратить введение препарата, ввести 10 мл 10%-ного хлорида кальция, 20 мл 40%-ной глюкозы, сердечные и антигистаминные средства. Для предупреждения осложнений необходимо проводить биологическую пробу;

2) дезинтоксикационные (гемодез): вводить со скоростью 40—80 капель в минуту, максимальная доза для взрослых 400 мл, для детей грудного возраста 5—10 мл/кг;

3) препараты белкового парентерального питания (белковые гидролизаты и аминокислотные смеси);

4) регуляторы водно-солевого и кислотно-щелочного равновесия.

Кровезамещающие жидкости, применяемые с лечебной целью, должны быть апирогенны, нетоксичны, стерильны. При помутнении, изменении цвета, появлении осадка из взвеси во флаконе раствор применять нельзя. Категорически запрещается переливать содержимое флакона нескольким больным.