Вирусы ЭКХО и Коксаки, вызываемые ими заболевания. Лабораторная диагностика энтеровирусных инфекций.

ЕСНО-вирусы — РНК-содержащие вирусы семейсива Picornaviridaeрода Enterovirus, насчитывают более 30 типов. Вирусы непатогенны для всех видов лабораторных животных. Хорошо размножаются в культурах клеток обезьяньего и человеческого происхождения. Резервуар в природе — человек. Вирусы выделяются из организма человека с фекалиями. Обнаруживаются в сточных водах, водных источниках и водопроводной воде. Передаются фекально-оральным механизмом и воздушно-капельным путем. 

ЕСНО-вирусы вызывают:

1) ОРВИ и лихорадку неясного генеза;

2) асептические менингиты (протекают относительно легко и не вызывают осложне-ний);

3) восходящие параличи и энцефалиты, напоминающие поражения, вызываемые по-лиовирусами;

4) лихорадочное состояние, сопровождающееся кореподобными высыпаниями.

После перенесенного заболевания формируется гуморальный типоспецифический иммунитет, продолжительность которого колеблется в разных пределах.

Вирусы Коксаки по биологическим свойствам подразделяют на:

1) вирусы группы А – у человека вызывают герпангину (герпетиформные высыпания на задней стенке глотки, сопровождающиеся дисфагией, лихорадкой, анорексией), пузырчатку в полости рта и конечностей, полиомиелитоподобные заболевания. Вирус Коксаки А24 вызывает геморрагический конъюнктивит.

2) вирусы группы В – полиомиелитоподобные заболевания, энцефалиты, миокардит, пери- и эндокардиты, спорадические параличи.

Основные механизмы передачи – фекально-оральный, возможен аэрозольный (воздушно-капельный путь передачи). Вирусы обладают высокой резистентностью во внешней среде, выживают в канализационных водах, на предметах обихода и пищевых продуктах.

70. ВИЧ-инфекция. Характеристика возбудителей. Лабораторная диагностика. Профилактика.

ВИЧ-инфекция – длительно текущая инфекционная болезнь, развивающаяся в результате инфицирования вирусом иммунодефицита человека. При ВИЧ-инфекции прогрессирует поражение иммунной системы, приводящее к состоянию, известному под названием «синдром приобретенного иммунного дефицита» (СПИД), при котором у больного развиваются «оппортунистические заболевания»»: тяжелые формы инфекций, вызванных условно-патогенными возбудителями, и некоторые онкологические заболевания. Основные способы передачи ВИЧ-инфекции характерны для всех парентеральных инфекций и включают гетеро- и гомосексуальные контакты, переливание крови и кровепродуктов, внутривенное употребление наркотиков, пересадка органов и тканей, вертикальная передача (от матери к ребенку во время беременности, родов, кормления грудью), профессиональные заражения (укол или порез инфицированными медицинскими инструментами). Основными причинами быстрого распространения ВИЧ инфекции являются многообразие естественных путей передачи, высокая общая восприимчивость людей к этой инфекции, высокая инфекционность вируса, длительный период заразности инфицированных, отсутствие надежных методов лечения и специфической профилактики.

Этиология возбудителя. Вирус иммунодефицита человека относится к РНК-содержащим вирусам и принадлежит к семейству Retroviridae, роду Lentivirus. Выделяют два типа вируса: ВИЧ-I, ВИЧ-II, которые отличаются по структурным и антигенным характеристикам. В настоящее время ВИЧ-I делят на три группы: М, N и О. Большинство изолятов относится к групп М, в которой выделяют 10 подтипов: А, В, С, D, F-l, F-2, G, Н, I, К. В России в настоящее время наиболее распространен подтип А.

Вирусная частица имеет сферическую форму, диаметр которой составляет 100 нм. Оболочка вируса состоит из двойного слоя липидов, пронизанного гликопротеиновыми шипами (gp). Гликопротеиновая молекула состоит из двух субъединиц: gp 120, находящейся на поверхности вириона и gp 41, пронизывающей его липидную оболочку. Сердцевина вируса имеет конусовидную форму и состоит из капсидных белков р24 и р25, матриксных белков р6, р7 и протеазы. Геном образует две нити РНК, состоит из 3 основных структурных генов (gag, pol, env) и 7 регуляторных и функциональных генов (tat, rev, nef, vif, vpr, vpu, vpx). Для процесса репродукции вирус имеет обратную транскриптазу (ревертазу). Ген gag (group antigen) - групповой антиген кодирует матриксные, капсидные, нуклеокапсидные белки и белки протеазы. Ген pol (polymerase) – кодирует обратную транскриптазу, ген env (envelope - оболочка) – кодирует поверхностный белок gp 120 и трансмембранный gp 41. Функциональные гены выполняют регуляторные функции и обеспечивают осуществление процессов репродукции и участие вируса в инфекционном процессе.

Жизненный цикл ВИЧ включает 4 стадии:

• адсорбция и проникновение вируса в клетку путем эндоцитоза;

• высвобождение вирусной РНК, синтез ДНК провируса и интеграция его в геном клетки-хозяина;

• синтез РНК вируса, трансляция и формирование вирусных белков;

• сборка, созревание и высвобождение из клетки путем почкования вновь сформированных вирионов.

Полный жизненный цикл вируса реализуется за 1—2 сут, при чем за это время формируется более 1 млрд вирусных частиц.

ВИЧ инфицирует клетки, несущие на своей поверхности CD4-рсцептор и хемокиновый рецептор CCR5 CXCR4: T-лимфоциты, макрофаги, фолликулярные дендритные клетки, клетки островков Лангерганса, клетки микроглии мозга.

Вирус также инфицирует широкий спектр СD4-негативных клеток, обладающих хемокиновым рецепторами: астроциты мозга, эпителий шейки матки, почечный эпителий, эпителий кишечника, эндотелиальные клетки капилляров мозга и шейки матки, клетки роговицы глаза.

Вначале вирус связывается с CD4-peцeптopом. Взаимодействие с корецепторами CCR5 CXCR4 необходимы для слияния вириона с клеточной мембраной, обеспечивающего проникновение ВИЧ в клетку.

Взаимодействие с CD4 и корецепторам приводит к конформационным изменениям в оболочке вируса, активируя gp41 (фактор слияния), запуская слияние мембран.

В результат взаимодействия с ВИЧ гибнут: T-лимфоциты, клетки нейроглии мозга (астроциты). Моноциты, макрофаги, клетки островков Лангерганса, фолликулярные дендритные клетки в результате взаимодействия с ВИЧ деградируются, действуя потенциально как резервуар инфекции для заражения других клеток.

Лабораторная диагностика.

Основанием для диагноза ВИЧ-инфекции служит обнаружение ВИЧ-специфических антител сыворотке крови, которые имеются у всех ВИЧ-инфицированных. Антитела к ВИЧ появляются у 90-95% зараженных в течение 3 месяцев после заражения, у 5-9% - через 6 месяцев от момента заражения, и у 0,5-1% - в более поздние сроки. Наиболее ранний срок обнаружения антител – 2 недели от момента заражения. Для этого используют метод ИФА (определение суммарного спектра антител против антигенов ВИЧ). В случае положительного результата используют повторный ИФА-тест и подтверждающий тест с применением иммуноблоттинга (проводится определение антител к отдельным белкам вируса). В ранние сроки заболевания в сыворотке крови методом ИФА можно определить вирусный белок р24. Разработан метод ПЦР для определения вирусного генома.

Профилактика. Специфическая профилактика не разработана. Все попытки создать эффективную вакцину пока потерпели неудачу. Однако и в России, и за рубежом проводятся интенсивные исследования по созданию таких препаратов. Профилактика ВИЧ-инфекции сводится к социальным и противоэпидемическим мероприятиям: пропаганде безопасного секса с использованием презервативов, использованию одноразовых шприцев и других медицинских инструментов, контролю крови и кровепродуктов, созданию банков крови и др. Важное значение имеют своевременное выявление ВИЧ-инфицированных, борьба с проституцией, наркоманией, гомосексуализмом, распущенностью, половое воспитание, просветительская работа среди населения. В России действует закон, предусматривающий уголовную ответственность за заведомую постановку другого лица в опасность заражения ВИЧ или умышленное заражение ВИЧ.

71. Возбудители анаэробной газовой инфекции. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая и неспецифическая профилактика. Принципы лечения.

Анаэробная инфекция — болезнь, вызываемая облигатными анаэробными бактериями в условиях, благоприятствующих жизнедеятельности этих микробов. Анаэробы могут поражать любые органы и ткани. Облигатные анаэробы разделяются на две группы: 1) бактерии, образующие споры (клостридии) и 2) неспорообразующие (неклостридиальные) анаэробы.

Газовая гангрена — полимикробное заболевание, вызываемая бактериями рода Clostridium, характеризуется быстро наступающим некрозом преимущественно мышечной ткани, тяжелой интоксикацией и отсутствием выраженных воспалительных явлений. В патогенезе важную роль играет сопутствующая микрофлора (стафилококки, стрептококки, энтеробактерии и др.). Источник инфекции — в фекалиях в виде спор, которые находятся в почве. Механизм передачи — контактный. Факторы, способствующие развитию заболевания — отсутствие кислорода, размозженные ткани, нарушение кровообращения тканей.

Таксономия. Возбудители — несколько видов рода Clostridium, сем. Bacillaceae. Основными представителями являются C.perfringens серовар А, C.novii, C.septicum, которые являются наиболее патогенными видами, каждый из которых может вызвать газовую гангрену. C.hystoliticum, C.fallaxспособны самостоятельно вызывать газовую гангрену, но чаще при этом заболевании они встречаются в ассоциации с другими анаэробами. C.tertium, C.sordelii — маловирулентные клостридии, не способные вызвать развитие газовой гангрены, но, присоединясь к возбудителям первой или второй группы, они существенно ухудшают течение болезни.

Морфологические и культуральные свойства. Палочковидные, грамположительные бактерии, образующие споры (округлой или овальной формы, располагаются в центре клетки субтерминально или терминально — диаметр споры больше диаметра клетки), подвижны (петрихии, имеют 15-20 жгутиков). В пораженных тканях клостридии газовой гангрены формируют капсулы, обладающие антифагоцитарной активностью, при попадании в окружающую среду образуют споры.

C.perfringensв жидких питательных средах, приготовленных из гидролизатов мяса или казеина, при 37-43С растет быстро (3-8 ч) с бурным газообразованием и изменением pHв кислую сторону. Существует три устойчивых варианта колоний: гладкий (S), слизистый (М) и шероховатый (R), однако при определенных условиях могут появляться колонии смешанного (О) варианта. Вокруг колоний, вырабатывающих альфа-токсин (лецитиназу), в желточном агареобразуется зона перламутрового преципитата. На среде Вильсона-Блер (железосульфитный агар, плотная селективная питательная среда для анаэробов) образуются колонии черного цвета в результате образования сернистого железа. На среде Цейсслера (сахарно-кровяной агар, с инкубацией по Госпако) колонии часто окружены одной или двумя зонами гемолиза и при выдерживании на воздухе приобретают зеленоватую окраску.

Биохимические свойства. Обладают высокой ферментативной активностью, расщепляют углеводы с образованием кислоты и газа; проявляют гистолитическую активность.

Антигенные свойства и токсинообразование. Каждый вид клостридии разделяется на серовары, продуцирующие экзотоксины и различающиеся по антигенным свойствам. Например, токсин С. perfringens подразделяется на 6 сероваров: А, В, С, D, Е и F. Из них патогенными для человека являются А, реже В, остальные патогенны для животных. С. novii по антигенным свойствам токсина разделяются на серовары А, В, С и D. Некоторые токсины обладают свойствами ферментов.

Факторы патогенности: Клостридии газовой гангрены образуют экзотоксин — а-токсин (действует на клеточную мембрану, разрывая фосфолипиды, возникают отеки, нарушение окислительно-восстановительного потенциала, в следствие чего некроз, цитотоксическая и гемолитическая активность), являющийся лецитиназой, а также гемолизины, коллагеназу, гиалуронидазу и ДНКазу. Экзотоксины специфичны для каждого вида клостридий.

Резистентность. Чувствительны к кислороду, солнечному свету, высокой температуре, дезинфектантам. Возбудители газовой гангрены, являясь нормальными обитателями кишечника животных и человека, с фекалиями попадают в почву, где споры длительное время сохраняются. В некоторых почвах клостридии могут размножаться.

Патогенез. Возникновению газовой гангрены способствует ряд условий: попадание микробов в рану (заболевание обычно вызывается ассоциацией нескольких видов анаэробов и реже одним из них), наличие некротических тканей, снижение резистентности. В некротических тканях анаэробы часто находят условия гипоксии, благоприятные для их размножения. Образуемые ими токсины и ферменты приводят к повреждению здоровых тканей и тяжелой общей интоксикации организма; а-токсин, лецитиназа, расщепляет лецитин — важный компонент клеточных мембран. Выделяемые гиалуронидаза и коллагеназа увеличивают проницаемость тканей, а также способствуют распространению микроба в окружающей ткани.

Иммунитет. Перенесенная инфекция не оставляет иммунитета. Ведущая роль в защите от токсина принадлежит антитоксинам.

Микробиологическая диагностика.

1. Бактериоскопический метод. Исследуемый материал — отечная жидкость, некротизированная ткань. Метод окраски препарата — по Граму, по Ожешко (+иммерсионная микроскопия). Вывод: появление крупных положительных по Граму палочек, часть из которых образует капсулу.

2. Бактериологический метод. Исследуемый материал — секционный материал, из входных ворот, пораженного участка, пупочный канатик (прижизненно).

1 этап. Засеваем на жидкую или полужидкую анаэробную среду (Китта-Тароцци — жидкая элективная питательная среда, в составе которой мясопептонный агар, обогащенный кусочками печени, Вильсона-Блер). Далее инкубируем под вазелиновым маслом.

2 этап. Высев с пробирочной среды на сахарно-кровяной агар Цейсслера (для изучения культуральных свойств и получения чистой культуры). Инкубация в анаэростате.

3 этап. Микроскопия чистой культуры (на 3й день), учет свойств на агаре и откол на жидкие или полужидкие среды (для накопления чистой культуры).

4 этап. Изучение биохимических свойств накопленных микроорганизмов на дифференциальных анаэробных средах (среды Гис, включая компонент для анаэробов) или на лабораторных животных для выявления явления токсигенности.

Изучение проводят на мышах:

1 пара: вводим 1 мл тиогликолевой среды с чистой культурой — одна из мышей погибает (т.к. работают патогенные токсины), другая — живая.

2 пара: одной из мышей ввели антитоксическую сыворотку (она не опасна, следовательно, мышь выживает), другой ввели чистую культуру + антитоксическую сыворотку (мышь выживает, так как сыворотка нейтрализовала токсин).

3 пара: одной из мышей ввели монорецепторную полигангренозную сыворотку А (не опасна, мышь выживает), другой -ввели чистую культуру с тиогликолевой средой + противогангренозную антитоксическую сыворотку А (не погибнет, так как произойдет нейтрализация токсина, но если в ней другой серовар, следовательно, погибнет).

Неспецифическая профилактика. Ранняя ПХО с иссечением нежизнеспособных тканей; при подозрительном состоянии послеопеорационной раны (не накладывая первичных швов!) вести наблюдение за ней; антибиотикотерапия; иммобилизация конечности.

Специфическая профилактика. Для специфической активной иммунизации применяют анатоксин в составе комплексного препарата - секстанатоксина, создающий приобретенный, искусственный, активный, антитоксический иммунитет. Анатоксин получен за счет его обезвреживания формалином и нагреванием, очищая и гидролизируя на гидроокиси алюминия.

Принципы лечения. Лечение заключается в обработке раны, раннее введение с профилактической целью поливалентной антитоксической очищенной концентрированной сыворотки по 10 тыс. ME. С лечебной целью эту дозу увеличивают в 5 раз (по 50 тыс. ME каждой сыворотки) применяют антибиотики. Лечение только одной сывороткой в ряд случае не дает нужного эффекта, в то время как комплексное применение антитоксической сыворотки антибиотиков сопровождается значительным снижением летальности.

72. Возбудители бруцеллеза. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика. Принципы лечения.

Бруцеллез – антропозоонозное инфекционное заболевание, которое характеризуется интоксикацией, преимущественным поражением опорно-двигательного аппарата, нервной, сердечно-сосудистой, мочеполовой систем, аллергизацией организма, затяжным течением, приводящим, как правило, к инвалидизации.

Морфологические и культуральный свойства.Бруцеллы – это мелкие грамотрицательные микроорганизмы шаровидной, овоидной или палочковидной формы. Спор не образуют, неподвижны, аэробы. Выращивают их на обычных питательных средах, лучшей считается печеночный агар и печеночный бульон с добавлением глюкозы и глицерина. В настоящее время в практике широко используется коммерческая среда для выделения бруцелл – эритрит агар. Характеризуются замедленным ростом на питательных средах до двух, четырех недель. Некоторые штаммы требуют для роста добавления 5-10% СО2, особенно при первоначальном выделении. Бруцеллы подвержены изменчивости и могут переходить из S-формы в R- и L-формы. На плотных питательных средах образуют гладкие прозрачные голубовато-сероватые колонии, на жидких средах – равномерное помутнение среды. Очень низкая биохимическая активность, продуцируют сероводород.

Возбудитель бруцеллеза относится к роду Brucella, который состоит из 6 самомтоятельных видов:

1. B. abortus- возбудитель бруцеллеза КРС, может мигрировать на лошадей, мулов, мало-патогенный для человека, вызывает обычно спорадические заболевания.

2. B. melitensis - возбудитель бруцеллеза МРС (овец и коз), может поражать КРС, очень патогенный для человека, вызывает спорадические и групповые заболевания и эпидеми-ческие вспышки.

3. B. ovis –вызывает бруцеллез у овец и баранов, в патологии человека существенной ро-ли не играет.

4. B. suis – возбудитель бруцеллеза свиней, зайцев, оленей, КРС и овец. По патогенности человека занимает промежуточное положение между B. Melitensis и B. Abortus.

5. B. canis – вызывает бруцеллез у собак.

6. B. neotome – основной источник пустынные древесные крысы (выделен в глухих лесах Америки в 1957г.).

Факторы патогенности. Бруцеллы являются факультативными внутриклеточными паразитами млекопитающих, включая человека. Также обладают: 1) высокой инвазивной способностью; 2) образуют фермент агрессии гиалуронидазу; 3) образуют эндотоксин; 4) образуют капсулу.

Эпидемиология. Бруцеллезом болеют в основном сельскохозяйственные животные (резервуары и источники инфекции). Больной человек не заразен, является биологическим тупиком. Клиническое течение бруцеллеза у животных характеризуется полиморфизмом, основным признаком является аборт. Помимо абортов бруцеллез у животных может сопровождаться поражением суставов (артриты), тендовагиниты, бурситы, эндометриты, вагинит, мастит, у самцов - орхит, эпидидимит. Бруцеллез у животных может протекать и в скрытой форме. Передача возбудителя бруцеллеза и заражение людей происходит контактным, алиментарным и реже – аэрогенным путем. Больные животные выделяют бруцеллы с молоком, мочой, калом, околоплодными водами.

Заболеваемость отмечается среди лиц, имеющих тесный контакт с больными животными (чабаны, пастухи, работники ферм, зоооветспециалисты, доярки). Особенно высока возможность инфицирования при оказании животным помощи во время родов и при абортах, когда проводят ручное отделение плаценты. Заражение может произойти при переработке мясного сырья, кожи, шерсти, шкур животных больных бруцеллезом (работники мясоперерабатывающей промышленности, кожзаводов, шерстеобрабатывающих предприятий). В таких случаях проникновение бруцелл в организм человека происходит через неповрежденные кожные покровы. При контактном пути заражения проникновение бруцелл происходит также через слизистые глаз, носа, ротовой полости.

Алиментарный путь передачи бруцелл возможен при употреблении пищевых продуктов, полученных от зараженных животных. Наибольшую опасность представляют сырое молоко и молочные продукты (брынза, сливки, сметана, кумыс и др.). Бруцеллы сохраняются в молоке до 10 дней, а в брынзе – до 45 дней. Мясо представляет значительно меньшую опасность, т.к. оно, как правило, употребляется в термически обработанном виде. Однако в ряде случаев при недостаточной термической обработке в связи с национальными особенностями приготовления пищи (строганина, шашлык с кровью, сырой фарш и др.) мясо и мясные продукты могут явиться причиной заражения бруцеллезом. Бруцеллы сохраняются во внутренних органах, костях, мышцах и лимфатических узлах инфицированных туш более одного месяца, а в замороженных продуктах в течение всего срока хранения.

Аэрогенный путь заражения человека бруцеллезом возможен при стрижке шерсти, сборе пуха, уборке скотных дворов, обработке шкур, убое скота. В шерсти бруцеллы сохраняют жизнеспособность при хранении при комнатной температуре в течение 3 месяцев. Аэрогенный путь заражения возможен в бактериологических лабораториях во время различных манипуляций при работе с чистыми культурами.

Клинические проявления. Инкубационный период составляет около 3 недель, но может продолжаться до 2 месяцев. Острая форма бруцеллеза протекает с длительной лихорадкой, ознобами, потливостью, болями в суставах, мышцах, с симптомами поражения ССС, НС, моче-половой, опорно-двигательного аппарата. В клинической картине хронического бруцеллеза доминируют очаговые поражения, имеющие в своей основе аллергический генез. Лихорадка почти отсутствует, температура субфебрильная и нормальная. Для бруцеллеза типично поражение нескольких суставов, в основном крупных. Функция суставов ограничивается из-за болезненности, они отечны, изменяется их конфигурация. Суставы увеличиваются в объеме, деформируются, движения в них сокращаются или полностью отсутствуют. В связи с этим развивается атрофия мышц. Нередко образуются бурситы локтевых суставов, реже коленных, голеностопных. Поражаются различные отделы позвоночника и особенно пояснично-крестцовое сочленение. Со стороны нервной системы отмечаются невриты, плекситы, радикулиты. Нередко поражаются половые органы. У мужчин возможны орхиты, эпидидимиты. У женщин отмечаются маститы, сальпингиты, эндометриты. Возможны аборты, преждевременные роды, развитие бесплодия.

Микробиологическая диагностика. Материалом для исследования являются: кровь, пунктат красного костного мозга, моча, испражнения, молоко, молочные продукты.

Методы лабораторной диагностики.

1. Бактериологический метод – при посевах крови, костного мозга и мочи культуры бруцелл обнаруживаются через 5-10 дней, а иногда через 20-30 дней после засева. Посевы крови рекомендуется делать во время лихорадочного состояния больного, до начала лечения антибиотиками.

2. Биологический метод используют для выделения бруцелл из материалов, загрязненных посторонней микрофлорой и при малой концентрации бруцелл в исследуемом материале. Для заражения используют морских свинок и белых мышей. 

3. Серологические методы: а) при проведении эпидобследования населения в очагах рекомендуется реакция агглютинации Хеддельсона, РПГА, ИФА, кожно-аллергическая проба Бюрне; б) для диагностики острого и подострого бруцеллеза проводят бактериологические исследования, ставят реакцию агглютинации и РПГА; в) для диагностики хронического бруцеллеза и при проведении диспансерного наблюдения за переболевшими бруцеллезом рекомендуется реакция Кумбса, ИФА и аллергические тесты.

4. Для быстрого обнаружения возбудителя бруцеллеза в пищевых продуктах, воде и патологическом материале рекомендуются: а)микроскопия препаратов, б) МФА, в) РНАт, г) ПЦР.

Лечение. Первое место в лечении острой формы бруцеллеза занимают антибактериальные средства. Широко применяют препараты тетрациклинового ряда, эффективен рифампицин, левомицетин и стрептомицин. Для уменьшения специфической сенсибилизации показано применение антигистаминных препаратов (димедрол, супрастин, пипольфен), модуляторов иммунитета (левамизол).

Лечение больных хроническим бруцеллезом проводят комплексно. Применяют антибиотики, назначают иммунотерапию (лечебная вакцина и бруцеллин), кортикостероидные препараты рекомендуют при поражениях со стороны центральной и периферической нервной системы. В случаях обширных суставных поражений назначают хинолиновые препараты, а также индометацин. Из средств симптоматической терапии применяют новокаиновую блокаду, физиотерапевтические процедуры (ионофорез, токи Бернара, УВЧ, кварц, согревающие компрессы, парафиновые аппликации, ультазвук). По специальному комплексу проводят лечебную физкультуру, массаж. Курортное лечение показано больным с клиникой по-следствий и с компенсированными формами хронического бруцеллеза.

В основе успешного лечения лежит принцип этапности (стационар, поликлинико-диспансерное наблюдение, санаторно-курортное лечение).

Профилактика состоит из комплекса ветеринарно-санитарных, хозяйственных, медико-санитарных мероприятий и включает ликвидацию инфекции среди сельскохозяйственных животных, обеззараживание объектов внешней среды в их окружении, обеззараживание продуктов и сырья животного происхождения, вакцинопрофилактику (используется сухая живая бруцеллезная вакцина, приготовленная из штамма коровьего вида B. Abortus 19-ВА), профилактические осмотры профессиональных контингентов; санитарно-просветительную работу.

73. Возбудители брюшного тифа и паратифов. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика. Принципы лечения.

Брюшной тиф и паратифы А и В — острые антропонозные кишечные инфекции, характеризующиеся поражением лимфатического аппарата кишечника, выраженной интоксикацией, бактериемией. Характеризуется циклическим течением. Фекально-оральный механизм передачи. Источником заболевания являются больные люди и бактерионосители.

Их возбудителями являются соответственно Salmonella typhi, Salmonella paratyphi А и Salmonella schottmuelleri (Salmonella paratyphi В).

Таксономическое положение. Отдел Gracilicutes, семейство Enterobacteriaceae, род Salmonella.

Морфологические и тинкториальные свойства. Сальмонеллы — мелкие грамотрицательные палочки с закругленными концами. В мазках располагаются беспорядочно. Не образуют спор, имеют микрокапсулу, перитрихи (подвижны).

Культуральные свойства. Сальмонеллы — факультативные анаэробы. Оптимальными для роста являются температура 37С. Растут на простых питательных средах и желчесодержащих. Элективной средой для сальмонелл является желчный бульон. На плотных питательных средах могут образовывать колонии в R- и S-формах, на жидких — диффузное помутнение. Колонии в S-форме мрежних размеров, гладкие, блестящие, полупрозрачные с голубоватым оттенком. Серовар Salmonella schottmuelleri при росте на плотных питательных средах образует слизистые валики.

Биохимическая активность сальмонелл достаточно высока, но они не сбраживают лактозу. S.typhi менее активна, чем возбудители паратифов. Осноные б/х свойства, необходимые для идентификации: ферментация глюкозы до кислоты и газа (S.Typhiне продуцируют газ), отсутствие ферментации лактозы, продукция сероводорода (за исключением Salmonella paratyphi А), отсутствие расщепления мочевины.

Антигенные свойства и классификация. Сальмонеллы имеют О- и H-антигены. Каждый вид обладает определенным набором антигенов. Все виды сальмонелл, имеющие общую так называемую групповую фракцию О-антигена, объединены в одну группу. Таких групп в настоящее время насчитывается около 65. S.typhi и некоторые другие сальмонеллы имеют Vi-антиген (разновидность К-антигена), с этим антигеном связывают вирулентность бактерий, их устойчивость к фагоцитозу.

Факторы патогенности. Сальмонеллы образуют эндотоксин, обладающий энтеротропным, нейротропным и пирогенным действием. С белками наружной мембраны связаны адгезивные свойства, наличие микрокапсулы обусловливает устойчивость к фагоцитозу.

Резистентность. Сальмонеллы довольно устойчивы к низкой т-ре. Очень чувствительны к дезинфицирующим веществам, высокой температуре, ультрафиолетовым лучам. В пищевых продуктах (мясе, молоке) сальмонеллы могут не только долго сохраняться, но и размножаться. При неблагоприятных условиях могут переходить в некультивируемую форму.

Патогенез. Возбудители попадают в организм через рот, достигают тонкой кишки, где в ее лимфатических образованиях (в пейеровых бляшках) размножаются. Следует отметить, что в подслизистой оболочке осмотическое давление по сравнению с просветом кишки ниже. Это способствует интенсивному синтезу Vi-антигена, который увеличивает антифагоцитарную активность возбудителя и подавляет выброс провосполительных тканевых медиаторов клетками подслизистой оболочки. Следствием этого является отсутствие развития воспалитеьной диареи на начальных этапах инфекции и интенсивное размножениее микробов в макрофагах, приводящее к воспалению пейеровых бляшек и развитию лимфаденита, следствием чего являются нарушение барьерной функции мезентериальных узлов и проникновение сальмонелл в кровь, в результате чего развивается бактериемия. Во время бактериемии, которая сопровождает весь лихорадочный период, с током крови возбудители разносятся по всему организму, внедряясь в паренхиматозные органы (селезенку, печень, почки, костный мозг). При гибели бактерий освобождается эндотоксин, вызывающий интоксикацию. Из купферовских клеток печени S. по желчным протокам, в которые они диффундируют, попадают в желчный пузырь, где также размножаются. S. могут длительно сохраняться в нем, вызывая воспаление, они вновь попадают в те же лимфатические образования тонкой кишки. В результате повторного поступления S. может развиться аллергическая реакция, проявляющаяся в виде воспаления, а затем некроза лимфатических образований, что может привести к кишечному кровотечению или прободению кишечной стенки (язвы возникают из-за антител, которые выработались в первый прием возбудителя, след-но, они уничтожают S. + действует эндотоксин и продукты массового разрушения S.). Сальмонеллы выводятся из организма с мочой, потом, материнским молоком (к концу 2 недели) и калом (в конце 2й нед или начале 3й нед).

Клиника. Клинически брюшной тиф и паратифы неразличимы. Инкубационный период составляет 12 дней. Болезнь начинается остро: с повышения температуры тела, появления слабости, утомляемости; нарушаются сон и аппетит. Для брюшного тифа характерны помутнение сознания, бред, галлюцинации, сыпь.

Иммунитет. Иммунитет после перенесенного заболевания напряженный и длительный. Протективный иммунный ответ обеспечивается синергическим действием клеточного иммунного ответа, в котором ведущая роль принадлежит активированным макрофагам. Гуморальный иммунитет самостоятельно не обладает протективной активностью, а является свидетелем инфекционного процесса. Первым к концу 1- нед заболевания появляются антитела к О-антигену, которые достигают максимальных титров к разгару заболевания, а потом исчезают. Антитела к Н-антигену появляются в период реконвалесценции, а также у привитых лиц и длительно сохраняются. У бактерионосителей брюшного тифа обнаруживают антитела к Vi-антигену.

Микробиологическая диагностика. Основной метод диагностики — бактериологический: посев и выделение S. typhi из крови (гемокультура) — 1 нед, фекалий (копрокультура), мочи (урино-культура), желчи — 2-3 нед.

1 этап. Посев крови на среду Рапопорт (МПБ+глюкоза (дифференциальный фактор)+желчь (ростовой фактор)+индикатор pH; во флаконы со средой помещается поплавок) в соотношении 1/10. Происходит расщепление без газов.

2 этап. 1) Учет роста на среде Рапопорт. S.Typhi – красная среда, мутная, без газа; S.ParatyphiA/B — красная среда, мутная, в конце есть поплавок газа.

2) Высев со среды Рапопорт на трехсахарный агар и среду Эндо. Для сокращения сроков исследования, так как мы предполагаем, что на среде Рапопорт уже имеем дело с чистой культурой. Высев на среду Эндо проводится для контроля чистоты выделенной культуры.

3 этап. 1) Контроль чистоты выделенной культуры по среде Эндо. (на основании культуральных и б/х свойств). Если на среде Рапопорт росла чистая культура — проводится учет б/х свойств по трехсахарному агару. Если культура смешанная — проводят откол лактозонегативных колоний со среды Эндо на трехсахарный агар.

2) Учет б/х свойств по трехсахарному агару. Глюкоза (желтый, +), Лактоза и/или сахароза (красный, -), сероводород (черный, +), следовательно, выделенная культура относится к роду S.

3) Серотипирование выделенной культуры. С помощью реакции агглютинации. Диагностический препарат — моновалентные и поливалентные сыворотки против S. (Определение определеннойй группе и серовару).

4 этап. Определение антибиотикорезистентности. (Метод стандартных дисков)

Серодиагностика брюшного тифа в РНГА (с помощью эритроцитарного сальмонеллезного диагностикума).

Для специфической профилактики брюшного тифа используют брюшнотифозную сорбированную и брюшнотифозную спиртовую, обогащенную Vi-антигеном вакцины. Для профилактики по эпидемиологическим показаниям лицам, которые проживают совместно с больным и которые употребляли продукты и воду, зараженные или подозрительно на заражение S. Typhi, назначают брюшнотифозный бактериофаг. Проводят этиотропную антибиотикотерапию.

74. Возбудители возвратных тифов. Характеристика. Лабораторная диагностика. Профилактика. Принципы лечения.

Возвратные тифы — группа острых инфекционных заболеваний, вызываемых боррелиями, характеризующихся острым началом, приступообразной лихорадкой, общей интоксикацией. Различают эпидемический и эндемический возвратные тифы.

Эпидемический возвратный тиф — антропонозная инфекция, возбудителем которой является B.recurrentis, впервые описанная в 1868 г. О.Обермейером. Единственным источником является лихорадящий больной, в периферической крови которого находятся боррелии. Переносчиком возбудителя являются вши, реже клопы, которые становятся заразными на 6-28 день после инфицирующего укуса. Человек заражается при втирании гемолимфы раздавленных шей в кожу, при расчесывании места укуса.

Эндемический (клещевой) возвратный тиф — зоонозное природно-очаговое заболевание. Возбудители представлены более 20 видами боррелий, циркулирующих в различных природных очагах тропиков и субтропиков разных стран. Резервуаром в природе являются грызуны, ряд других животных, а также агарсовые клещи, у которых микроб передается трансовариально. Человек заражается через укусы клещей рода Ornithodoros.

РодBorrelia включает более 30 видов спирохет. Непатогенный вид В. bиссаlia входит в состав постоянной микрофлоры полости рта. Патогенные виды родаBorrelia вызывают как антропонозные (возвратный тиф), так и зоонозные (эндемический возвратный тиф, болезнь Лайма) инфекционные заболевания с трансмиссивным путем передачи возбудителей через клещей и вшей. Боррели обладают уникальным, не имеющим аналогов среди других бактерий генетическим аппаратом, который состоит из небольших размеров линейной хромосомы и набора циркулярных плазмид. Боррелии представляют собой тонкие спирохеты размером 0,3—0,6x20 мкм 3—10 крупными завитками. Двигательный аппарат состоит из 15—20 фибрилл. Они хорош воспринимают анилиновые красители, по Романовскому—Гимзе окрашиваются в сине-фиолетовый цвет. Боррелии могут культивироваться на сложных питательных средах, содержащих сыворотку, асцит, тканевые экстракты, при 28—35 С в атмосфере 5—10% СО2 , а также в куриных эмбрионах при заражении в желточный мешок. Чувствительны к высыханию и нагреванию. При 45—48 ° гибнут в течение 30 мин. Устойчивы к низким температурам и замораживанию.

Патогенез и клиническая картина. Патогенез и клинические проявления обоих типов возвратных тифов схожи. Инкубационный период длится 3—14 дней. Попавшие в организм боррелии внедряются и захватываются клетками лимфоцитарно-макрофагальной системы, размножаются в них и попадают в большом количестве в кровь, вызываялихорадку (повышение температуры тела до 39— 40 °С), головную боль, озноб. Каждая такая атака заканчивается повышением титра антител. Взаимодействуя с ними, боррелии образуют агрегаты, которые нагружаются тромбоцитами, вызывая закупорку капилляров, вследствии чего происходит нарушение кровообращения в органах. Подвлиянием антител большая часть боррелий погибает. Однако в связи с особенностью строения генетического аппаратапроисходит вариация антигенного состава боррелий. Это является результатом того, что часть генов, кодирующих антигены, локализованы на разных плазмидах и находится периодически в неактивной молчащей форме. В результате межгенных перегруппировок происходят активации молчащегогена и появление нового антигенного варианта, а так как антителабыли выработаны к одному определенному варианту, то новые антигенные варианты боррелий размножаются и вызывают рецидиы заболевания. Это повторяется от 3 до 20 раз. Прогноз эндемического возвратного тифа благоприятный. Летальность при эпидемическом возвратном тифе не более 1%.

Иммунитет. Иммунитет к эпидемическому возвратному тифу гуморальный непродолжительный. В эндемическийх очагах коренное население к возбудителю эндемического возвратного тифа, циркулирующего в очаге, располагает иммунитетом. Микробиологическа диагностика. Используют бактериоскопический метод: исследование кровибольного на высоте приступа лихорадки путем окрашивания толстой капли крови по Романовскому—Гимзе или темнопольную микроскопию висячей капли крови. Биопробу ставят для дифференциации В. recurrentis возбудителей эндемического возвратного тифа: морские свинки легко заражаются возбудителями клещевого возвратного тифа, а белые мыши и крысы — В. recurrentis. В качестве вспомогательного используют серологический метод с постановкой ИФА и непрямой РИФ.

Лечение. Применяют этиотропную антибиотикотерапию (антибиотики тетрациклинового и пенициллинового ряда).

Профилактика включает борьбу с переносчиками и с завшивленностью населения. Специфическая иммунопрофилактика отсутствует.