Факторы вирулентности бруцелл

Микробиологическая диагностика. Серологический метод: реакции агглютинации Райта, Хеддльсона, РНГА, ИФА и др. Бактериологический метод в специальных лабораториях: выделение гемо- и миелокультуры. Brucella abortus выращивают в атмосфере СО₂. Кожно-аллергическая проба Бюрне. Молекулярно-генетический метод: ДНК-ДНК-гибридизация.
Специфическая профилактика. Живая бруцеллезная вакцина по эпидемиологическим показаниям

Бруцеллёз-зоонозная инф, передающаяся от больных животных человеку, характеризующаяся множественным поражением органов и систем организма человека.Таксономия: Возбудители бруцеллеза B.melitensis, B.abortus, B.suis, B.canis, B.ovis относятся к отделу Gracilicutes, роду Brucella.Морф-и тинкториальные свойства: Мелкие, грамотрицательные палочки овоидной формы. Не имеют спор, жгутиков, иногда образуют микрокапсулу.

Культ свойства: облигатные аэробы. B.abortus для своего роста нуждается в присутствии 5—10 % углекислого газа. Опт для роста 37С. Требовательны к питсредам и растут на спецсредах (печеночных, кровяной агар).особенность медленный (2 нед) рост. В жидких средах – равномерное помутнение с небольшим осадком.На плотных – мелкие, круглые гладкие голубые колонии. Диссоциация от S- к R-формам колоний.Биохимактивность: очень низкая; содержат каталазу и оксидазу, нитраты редуцируют в нитриты, цитраты не утилизируют, продуцируют Н2S.

Антиг структура. O-антиген – соматический, и капсульный антигены. Две разновид­ности О-антигена — А(абортус) и М(мелитензис). Иногда обнаруживают К-антиген.

Факторы патогенности: Образуют эндотоксин, Продуцируют один из ферментов агрессии — гиалу-ронидазуРезистентность. Быстро погибают при кипяче­нии, при действии дезинфицирующих веществ, устойчивы к низкой температуре: Источник - крупный и мелкий рогатый скот, свиньи, овцы, выделяющие Патогенез.попадают сначала в регионарные лимфатические узлы, затем в кровь, разносятся по всему организму и внедряются в органы ретикулоэндотелиальной системы (печень, селезенку, костный мозг). Там они могут длительное время сохраняться и вновь попадать в кровь. При гибели освобождается эндоток­син, вызывающий интоксикацию.Клиника: Инкуб период 1—3 нед.Длительная лихорадка, озноб, потливость, боли в суставах, радикулиты.Иммунитетнепрочный Клеточно-гуморальный, нестерильный, относительный.Микроб диагностика:1)серологические исследований (реакция Райта и Хеддлсона). Для серодиагностики используют РПГА, РИФ, РСК, метод опреде­ления неполных антител. В поздние периоды-кожно-аллергическая проба и реакция Кумбса.

2)Бактериологическое исследование. Для получе­ния гемокультуры кровь засевают в два флакона печеночного бульона. Один из них (для выделения культуры В. melitensis) инкубируют в обычных аэробных условиях, другой (для выделения первич­ной культуры В. abortus) —с СО2. 3)Для быстрой идентификации бруцелл ставят реакцию агглю­тинации со специфическими агглютинирующими сыворотками на стекле и определяют чувствительность к специфическому фагу. 4)Биопроба. Применяется для выделения чистой культуры из материала, загрязненного посторонней микрофлорой. (морским свинкам подкожно в паховую область). 5)Кожно-аллергическая проба (реакция Бюрне). На предплечье внутрикожно вводят 0,1 мл бруцеллина. При наличии аллергии уже через 6 ч. могут появиться гипере­мия кожи и болезненная отечность. Лечение: Антибиотики широкого спектра действия. Специфическая иммунотерапия убитой лечебной бруцеллезной вакциной или бруцеллина (При острых формах – бруцеллезный иммуноглобулин.Профилактика: Живая бруцеллезная вакцина получена штамма ВА-19А, полученную из В. abortus, создает перекрестный иммунитет против других видов бруцелл.

Накожная сухая живая бруцеллезная профилактическая вак­цина. Взвесь штамма. В. abortus

3.Общее микробное число определяют глубинным посевом (на плотной среде) Перфрингенс-титр почвы - минимальное количество почвы, в кото­ром еще определяются Clostridium perfringens. При фекальном загрязнении почвы клостридии обнаруживают в титре 0,01 г. Определяют перфрингенс-титр глубинным посевом.Оценка фекального заражения проводится по индексу БГКП – коли-титр(количество БГКП в 1 г почвы).На свежее фекальное загрязнение указывают: обнаружение эн­терококков, большое количество БГКП при отсутствии нитри­фицирующих бактерий, относительно высокое со­держание вегетативных форм клостридий.сильно загрязненных почв – 0,009; чистых – коли-титр 1,0; перфрингенс-титр – 0,01.Почва как фактор передачи инфекционных болезней.Почва является местом обитания спорообразующих палочек родов Bacillus и Clostridium.

Билет № 11

1.Вирус иммунодефицита человека - ВИЧ-1, ВИЧ-2 (human immunodeficiency virus - HIV-1, HIV-2) относится к семейству Retroviridae, подсемейству Lentivirinae. Вызывает у человека ВИЧ-инфекцию, терминальной стадией которой является СПИД (синдром приобретенного иммунодефицита), или AIDS (acquired immunodeficiency syndrome). ВИЧ-инфекция характеризуется преимущественным поражением иммунной системы, длительным течением, полиморфными клиническими проявлениями и высокой летальностью.

Структура

Вирион имеет сферическую форму размером 100нм, снаружи покрыт оболочкой, сформированной при почковании через плазматическую мембрану. Оболочка содержит белки: поверхностные, групповые гликопротеины gp120 и gp41 (продукты расщепления белка предшественника gp160). Сердцевина ВИЧ похожа на усеченный цилиндр. Под оболочкой находятся матриксный протеин p17, капсидный протеин p24, нуклеокапсидные протеины (p7, p9 и др.), а также протеины протеазы(p10, p11), интегразы (р31-32) и обратной транскриптазы (p66/p51).
Капсид заключает две идентичные копии плюс (+) нити РНК-генома, содержащие структурные гены gag, pol, env.
Ген gag (group specific antigen) кодирует группоспецифические антигены сердцевины, матрикса.
Ген pol (polymerase) кодирует обратную транскриптазу, протеазу и интегразу.
Ген env (envelope) кодирует образование гликопротеиновой оболочки. Имеются также функциональные гены tat, rev, nef, vif, vpr,vpx, vpu, которые регулируют жизненный цикл вируса. Геном ВИЧ-2 отличается от генома ВИЧ-1 структурой гена env и заменой гена vpu на ген vpx.

Микробиологическая диагностика.Серологический метод. Применяется иммуноферментный анализ (ИФА) - тест первого уровня для выявления ВИЧ-инфицированных. В качестве диагностикума используют антигены, выделяемые из зараженных клеточных культур или полученные с помощью рекомбинантных ДНК. В сыворотке крови определяют антитела к белкам gp120, р24 и другим антигенам ВИЧ. Положительный результат ИФА подтверждается постановкой иммуноблотинга (вестернблотинга). Результаты считают положительными после обнаружения антител к p24, p31, gp41 либо к gp120. На начальных стадиях заражения эффективно определение антигена p24 в крови. Молекулярно-генетический метод: ПЦР и метод гибридизации нуклеиновых кислот. Важным показателем ВИЧ-инфекции является определение содержания CD4+-лимфоцитов и соотношение CD4/CD8.
Специфическая профилактика: надежной и безопасной вакцины не существует.

Вирус иммунодефицита человека вызывает ВИЧ-инфекцию, заканчива­ющуюся развитием синдрома приобретенно­го иммунного дефицита.Возб ВИЧ-инфекции — лимфотропный вирус, относящийся к семейству Retroviridae роду Lentivirus.Морф свойства: РНК-содержащий вирус. Вирусная частица сферической формы Оболочка из 2го слоя липидов, пронизанного гликопротеинами. для осуществления репродукции ВИЧ имеет обратную транскриптазу, или ревертазу.Культ с-ва: на культуре клеток Т-лимфоцитов и моноцитов человека (в присутствии ИЛ-2).Антигструктура: 2 типа вируса — ВИЧ-1 и ВИЧ-2. ВИЧ-1, имеет более 10 генотипов (субтипов): А, В, С, D, E, F, ВИЧ-1 делят на 3 груп­пы: М, N, О. Чувствителен к физ. и хим факторам, гибнет в при нагревании. Вирус может длительно сохраняться в высушенном состоянии, в высохшей крови.патогенез: Вирус прикрепляется к лимфоциту, проникает в клетку и репродуцирует в лимфоците. В результате размножения ВИЧ в лимфоците последние раз­рушаются или теряют свои функц св-ва., Эпидемиология:пути передачи (с кровью, половой путь, от матери ребенку)Клиника: поражается дыхательная система; ЦНС (абсцес­сы, менингиты); ЖКТ,возникают злокачествен­ные новообразования.несколько стадий ВИЧ-инф: 1) инкуб период, 2-4 нед; 2) первичные проявления, вначале остр лихорад, диареей; завер­ся стадия бессимптомной фазой и персистенцией вируса,в крови опрВИЧ-антитела, 3)вторичнык заболевания, 4)терминальная стадия- СПИД.Микроб диагностика.Вирусологические и серологические ис­следования включают методы определения антигенов и антител ВИЧ. используют ИФА, ИБ и ПЦР. Клин-е и серологический диагнозы подтверждаются иммунологическими иссл­ми, если они указывают на наличие иммунодефицита у обследуемого пациента.Лечение: применение ингибиторов обратной транскриптазы, действующих в активирован­ных клетках. Препараты являются производные тимидина — азидотимидин и фосфазид.Профилактика. Специфическая - нет. 1)использовать презерватив при каждом сексуальном контакте. 2)не употреблять наркотики.

3)использовать стерильное мед оборудование. 4)ВИЧ(+)беременная женщина, должна выполнять все рекомендации.

2.Газовая гангрена — раневая инф, вызываемая бактериями рода Clostridium, характеризуется бысстро наступающим некро­зом преим-но мышечной ткани, тяжелой интоксикацией и отсутствием выраженных восп-х явлений.Таксономия. род Clostridium, отдел Firmicutes. Основными представителями являются C.perfringens(частые), C.novii, C.ramosum, C.septicum и др.Морф и культ св-ва.Палочковидные, грамположительные бактерии, образующие споры. В пораженных тка­нях клостридии газовой гангрены формируют капсулы, , при попадании в окру­жающую среду образуют споры.Биохим св-ва. Выс-ая ферментативной активностью, расщепляют углеводы с образованием кислоты и газа; проявляют гистолитическую ак­тивность.Факторы патогенности:образуют экзотоксин - а-токсин, являющийся лецитиназой, а также гемолизины, коллагеназу, гиалуронидазу и ДНКазу. Резистентность.Чувствительны к кислороду, солнечному свету, высокой температуре, дезинфектантам. Патогенез. Возникновению газовой гангрены способствует ряд условий: попадание микробов в рану, наличие некротических тканей, снижение резистентности. Клиника. Инкуб период 1-3 дня. Отеки, газо­бразованием в ране, выраженной интоксикацией организма. Микроб.диагностика Материал для исследования (кусочки пораженных тканей, раневое отделяемое) микроскопируют. Диагноз подтверждается при обнаружении грам «+» палочек в материале в отсутствии лейкоцитов.бактериологическое исследование – обнаружение С.perfringens в фекалиях – пищевая токсикоинфекция;Лечение.Хирургическое: удаляют некротические ткани. Вводят антитоксические сыворотки(в жидком и сухом виде), применяют антибиотики и гипербарическую оксигенацию.Профилактика. Хирур­гическая обработка ран, соблюдение асептики и антисептики при операциях.  Для специфической активной =т анатоксин в составе секстанатоксина, создающий приобретенный, искусственный, активный, антитоксический иммунитет.

3. Сохранение их и особенности доставки в бактериологическую лабораторию.
При взятии материала для проведения бактериологического исследования следует учитывать следующее:
а) выбор биологического материала для исследования определяется локализацией предполагаемого возбудителя на данном этапе
болезни. В случае отсутствия или неопределенности локальных очагов исследуют кровь. Брать материал следует непосредственно из очага инфекции или исследовать соответствующее отделяемое
(гной, мочу, желчь и т.п.);
б) брать материал рекомендуется до начала
антибактериальной терапии или через определенный промежуток времени послевведения препарата, необходимого для его выведения из организма (от 8 ч до 3 сут в зависимости от препарата и предполагаемого возбудителя);
в) брать материал нужно во время наибольшего содержания в нем возбудителей заболевания (например, кровь для выделения
гемокультуры при повышении температуры в начале периода озноба и т.д.);
г) следует соблюдать правила асептики (во избежание контаминации пробы микрофлорой окружающей среды и представителями нормальной микрофлоры тела);
д) отбор материала для выделения аэробов и факультативных анаэробов производят стерильными ватными тампонами (отделяемое из раны, мазки со слизистых оболочек, из глаза, носа, зева, цервикального канала, влагалища, анального отверстия), специальными приспособлениями (петлями, трубками, щетками и др.), шприцем (кровь, гной, экссудаты), непосредственно в стерильную посуду (моча, мокрота, фекалии);
е) материал для выделения строгих анаэробов получают из патологического очага путем пункции шприцем, из которогопредварительно удален воздух, при исследовании кусочков ткани их берут из глубины очага. При необходимости использовать тампоны их нужно сразу же после взятия материала погружать в транспортную среду;
ж) количество материала должно быть достаточным для исследования и его повторения в случае необходимости; при низкой концентрации возбудителя стараются взять большое количество материала;
з) транспортировку нативного клинического образца материала в лабораторию следует производить в максимально короткие сроки, так как при длительном его хранении происходит гибель многих видов возбудителей, начинают размножаться менее
требовательные и быстро растущие виды, что приводит к нарушению количественного соотношения видов микробов. Если материал нельзя немедленно транспортировать в лабораторию, следует использовать транспортные среды или поместить материал в условия бытового холодильника (приемлемо не для всех возбудителей). Материал для микробиологического исследования транспортируют в специальных биксах, пеналах и т.п.;
и) клинические образцы для культивирования анаэробов следует транспортировать в лабораторию, максимально защищая их от воздействия кислорода воздуха (используют специальные герметично закрытые флаконы, заполненные бескислородной газовой смесью или специальной транспортной средой, в которую
вносят исследуемый материал уколом иглы через резиновую пробку флакона; материал можно транспортировать прямо в шприце, на
кончик которого надета стерильная резиновая пробка);
к) к клиническому образцу, направляемому в лабораторию, прилагают сопроводительный документ, содержащий основные сведения, необходимые для проведения микробиологического исследования (характер материала, Ф.И.О. больного, название учреждения или отделения, номер истории болезни, предполагаемый диагноз заболевания, предшествующая антимикробная терапия, дата и время взятия материала, подпись врача, направляющего материал для исследования).

Билет №12

1.Грибы относятся к царству Fungi. Много- или одноклеточные нефотосинтезирующие эукариотические микроорганизмы с кл. стенкой.имеют ядро с ядерной оболочкой, цитоплазму с органеллами, цитоплазматическую мембрану и многослойную, ригидную клеточную стенку,

Различают гифальные и дрожжевые формы грибов.Гифальные (плесневые) грибы образуют ветвящиеся тонкие нити (гифы), сплетающиеся в грибницу, или мицелий (плесень). Гифы, врастающие в питательный субстрат, называются вегетатив­ными гифами (отвечают за питание гриба), а растущие над поверхностью субстрата — воздушными или репродуктив­ными гифами (отвечают за бесполое размножение).Гифы низших грибов не имеют перегородок. Они пред­ставлены многоядерными клетками и называются ценоцитными.Гифы высших грибов разделены перегородками, или сеп­тами с отверстиями.Грибы размножаются спорами половым и бесполым спосо­бами, а также вегетативным путем (почкование или фрагмента­ция гиф). Грибы, размножающиеся половым и бесполым путем, относятся к совершенным. Несовершенными называют грибы, у которых отсутствует или еще не описан половой путь размно­жения. Бесполое размножение осуществляется у грибов с помощью эндогенных спор, созревающих внутри круглой структуры — спорангия, и экзогенных спор — конидий, форми­рующихся на кончиках плодоносящих гиф.Типы грибов. Выделяют 3 типа грибов, имеющих половой способ размножения (: зигомицеты (Zygomycota), аскомицеты (Ascomycota) и базидиомицеты (Basidiomycota). Отдельно выделяют условный, формальный тип/группу грибов — дейтеромицеты (Deiteromycota), у которых имеется только бесполый способ размножения (так называемые несовершенные грибы).

Классификация грибов. Грибы можно разделить на 7 классов: хитридиомицеты(водные),гифохитридиомицеты, оомицеты, зигомицеты, аскомицеты, базидиомицеты, дейтеромицеты.К несовершенным грибам относятся грибы рода Candida, по­ражающие кожу, слизистые оболочки и внутренние органы (кандидоз). Они имеют овальную форму, диаметр 2—5 мкм; делятся почкованием (бластоспоры), образуют псевдомицелий (почкующиеся клетки из ростковой трубочки вытягиваются в нить), на концах которого находятся хламидоспоры. Эти грибы называют дрожжеподобными. Истинные дрожжи (аскомицеты) образуют аскоспоры, не имеют псевдомицелия и хламидоспор.Подавляющее большинство грибов, вызывающих заболевания у человека (микозы), относятся к несовершенным грибам. Развитию кандидоза способствуют неправильное назначение антибиотиков, обменные и гормональные нарушения, иммунодефициты, повышенная влажность кожи, повреждения кожи и слизистых оболочек.Преобладает клеточный иммунитет. Микробдиагностика Посевы от больного проводят на агар Сабуро, сусло-агар и др. Колонии С. albicans беловато-кремовые, выпуклые, круглые. Грибы дифференцируют по морфологическим, биохимическим и физиологическим свойствам. Для бластоспор Candida albicans характерно образование ростковых трубок при культивировании на жидких средах с сывороткой или плазмой (2-3 ч при 37 °С

2. Bacillus anthracis (от греч.anthrax - злокачественный карбункул) - вызывает сибирскую язву - острую зоонозную инфекцию, характеризующуюся тяжелой интоксикацией, поражением кожи, лимфатических узлов и других тканей. Человек заражается контактным путем (при уходе за больными животными, убое, переработке животного сырья), реже алиментарным путем (при употреблении мяса и других животноводческих продуктов), воздушно-пылевым путем. Резервуар и источник инфекции: крупный и мелкий рогатый скот, лошади, верблюды, свиньи. Споры B.anthracis длительно сохраняются в почве и могут служит источником инфекции.

Морфология

Грамположительные спорообразующие прямые палочки (0,5-2,5 х 1,2-10 мкм) с обрубленными или слегка закругленными концами, образующие цепочки. Неподвижны. Аэробы или факультативные анаэробы. Могут образовывать капсулы. Споры располагаются центрально. Они чрезвычайно устойчивы и сохраняются в окружающей среде десятки лет.