Экзаменационный билет № 64.

ОБЩАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ
1. Тинкториальные свойства бактерий. Связь с особенностями строения трёх основных типов клеточной стенки бактерий.

Сущ три вида клет стенок бактерий,В первых двух случаях ее основу составляет пептидогликан муреин. У одних бактерий (1-й тип) он составляет до 90 % массы клеточной стенки и образует многослойный (до 10 слоев) каркас, при этом муреин связан с тейхоевыми кислотами. Такие бактерии при окраске по методу Грама прочно удерживают комплекс генцианового фиолетового и йода,это связано со свойтвом ПГ,кроме этого после обработки мазка спиртом поры в ПГ сужаются и краситель задерживается в стенке.; они окрашиваются в сине-фиолетовый цвет и называются грамположительными.

У бактерий со 2-м типом строения клеточной стенки поверх 2–3 слоев пептидогликана муреина располагается слой липополисахаридов(он состоит из липида А(эндотоксин),сердцевины и полисахаридных цепей,которые явл O-АГ). Эти бактерии при окраске по методу Грамма не способны прочно удерживать окраску и, соответственно, обесцвечиваются спиртом, прокрашиваясь дополнительным красителем – фуксином в розово-красный цвет. Они называются грамотрицательными.

Кроме того, существуют L-формы бактерий, которые полностью или частично лишенные клеточной стенки, но способны к размножению, являясь вполне полноценными микробными клетками данного вида бактерий. Если нет ПГ(н-р у микоплазм), то по Граму не окрашиваются.

Кислотоустойчивые бактерии. Клеточная стенка некоторых бактерий содержит большое количество липидов и восков, делающих их устойчивыми к последующему после окрашивания обесцвечиванию кислотами, щелочами или этанолом (например, виды Mycobacterium) Для их окраски применяют метод Циля-Нильсена. Основан на использовании концентрированных красителей прогревания.Кислотоустойчивые бактерии и споры рубиново- красного цвета, а остальная микрофлора — синего цвета

Нейссера метод окраски — способ окраски дифтерийных палочек для выявления зерен волютина(включение); используется для обнаружения и идентификации дифтерийных палочек. Гранулы окраш-ся красно-фиолет, а цитоплазма-синим.

ИММУНОЛОГИЯ
Иммуноглобулины. Антитела

Антитела- специфические эффекторы гуморального иммунитета.

Биохим и клеточная природа антител:

1)крупные гликопротеины

2)белки плазмы крови, участвующие в ИО-иммуноглобулины

3) при электрофорезе АТ мигрируют в основном с фракцией гаммаглобулинов

Клеточная природа антител:

Продуцируются плазматическими кл- потомками клона специфических В-лимфоцитов, котрые контактировали с соотв антигеном

Специфичность АТ: конкретный Ig способен связываться с АГ, вызвавшим его образование.

Антитела имеют форму буквы Y: каждая структурная единица-домен; с антигеном взаимодействуют вариабельные домены.

Большинство молекул иммуноглобулинов составлено из двух тяжелых (H) цепей и двух легких (L) цепей, соединенных дисульфидными связями. Легкие цепи состоят или из двух k-цепей, или из двух l-цепей. Тяжелые цепи могут быть одного из пяти классов (IgA, IgG, IgM, IgD и IgE).

Каждая цепь имеет два участка:

1) постоянный. Остается постоянным в последовательности аминокислот и антигенности в пределах данного класса иммуноглобулинов;

2) вариабельный. Характеризуется большой непостоянностью последовательности аминокислот; в этой части цепи происходит реакция соединения с антигеном.

Каждая молекула IgG состоит из двух соединенных цепей, концы которых формируют два антигенсвязывающих участка. На вариабельном участке каждой цепи имеются гипервариабельные участки: три в легких цепях и четыре в тяжелых. Разновидности последовательности аминокислот в этих гипервариабельных участках определяют специфичность антитела. При определенных условиях эти гипервариабельные области могут также выступать в роли антигенов (идиотипов).

Понятия об аллотипах, идиотипах.

Аллотипантител определяется константными доменами и каркасными участками вариабельных доменов H и L цепей.

Идиотипопред-ся структурным своеобразием вариабельных доменов, формирующих паратоп.

Динамика антител в ходе первичного и вторичного ИО:

После поступления чужеродного АГ в организм через несколько дней начинают появляться антитела плазмы крови. В процессе инфекционного заболевания концентрация антител увеличивается. Приблизительно через 3 дня появляются IgM, затем в небольшом кол-ве IgG.

Реакция на первый и повторный контакт отличаются.

2. Клонированность В-лимфоцитов означает:
1. Способность синтезировать антитела одного класса. 2. Способность синтезировать антитела одной специфичности. 3. Способность продуцировать антитела определенного аллотипа. 4. Избирательную рецепцию иммунорегуляторных цитокинов. 5. Избирательную рецепцию антигенов (эпитопов).

B-лимфоци́ты— функциональный тип лимфоцитов, играющих важную роль в обеспечении гуморального иммунитета. При контакте с антигеном или стимуляции со стороны T-клеток некоторые B-лимфоциты трансформируются в плазматические клетки, способные к продукции антител. Другие активированные B-лимфоциты превращаются в B-клетки памяти. Помимо продукции антител, В-клетки выполняют множество других функций: выступают в качестве антигенпрезентирующих клеток, продуцируют цитокины и экзосомы.

Способны синтезировать антитела разных классов.

Специфичность антител: конкретный Ig способен связываться с антигеном, вызвавшим его образование. То есть действует правило: 2 разных АГ реагируют с двумя разными АТ

Аллотип антител определяется константными данными и каркасными участками вариабельность доменов, В-лимфоциты не способны продуцировать АТ определенного аллотипа.

В-лимфоциты избирательно НАПРЯМУЮ распознают в-эпитопы (эпитоп-часть молекулы антигена, обладающая специфичностью, т.е. структурной индивидуальностью)

БАКТЕРИОЛОГИЯ
3. Позиции, справедливые для риккетсий:
1. Зависимость от энергетического метаболизма клеток. 2. Размножение путем деления. 3. Дизъюнктивный способ репродукции. 4. Размножение внутри фагосом. 5. Размножение в цитоплазме и/или ядре.

Риккетсии представляют особую группу микроорганизмов, включающую как сапрофиты, так и патогенные виды. Название «риккетсии» они получили в честь американского ученого Риккетса, который впервые в 1910 г. обнаружил возбудителя сыпного тифа в крови больного и в зараженных вшах. Морфологически они сходны между собой, напоминают бактерии, полиморфны (могут иметь форму очень мелких палочек, кокков, нитей), грамотрицательны.

Как и вирусы, риккетсии являются внутриклеточными паразитами и размножаются только в клетках живого организма: в цитоплазме и ядре клеток. Зависят от энергетического метаболизма клеток, т.к являются облигатными внутриклеточными паразитами, рост и размножение которых происходят в клетках подходящего хозяина.

Жизненный цикл риккетсий имеет две стадии — вегетативную и покоящуюся. В вегетативной стадии микроорганизмы представлены палочковидными, бинарно делящимися и подвижными клетками.

Риккетсии являются возбудителями различных лихорадочных заболеваний, которые называются риккетсиозами. Они вызывают заболевай, клещи, блохи), диких и домашних животных и у человека. У вшей риккетсиоз заканчивается гибелью, у клещей и блох он протекает длительное время бессимптомно. Среди диких животных риккетсиозы поражают главным образом грызунов. Некоторые виды риккетсий вызывают заболевания у крупного и мелкого рогатого скота. У человека риккетсии вызывают различные заболевания. 

ВИРУСОЛОГИЯ
4. Положения, справедливые для СПИД-фазы ВИЧ-инфекции:
1. Высокий уровень ВИЧ-вирусемии. 2. Резкое снижение (абсолютное и относительное) количества CD4 Т-лимфоцитов. 3.Клинически (патогенетически) значимый иммунодефицит. 4. Длительный инкубационный (предспидовый) период. 5.Клиническая («спидовая») специфика. 6. Серопозитивность (анти-ВИЧ антитела). 7. Чередование обострений и ремиссий.

Здесь надо нарисовать схему стадий ВИЧ инфекций

СПИД –это терминальная стадия характеризуется:

· Преимущественным поражением иммунной системы

· Парентеральным механизмом передачи

· Длительным течением

· Полиморфностью клинических проялений

· Высокая летальность

Структура

ВИЧ относится к семейству ретровирусов.

Вирион имеет сферическую форму, диаметром 100–150 нм. Кубический тип симметрии. Наружная (суперкапсидная) оболочка вируса состоит из бимолекулярного слоя липидов, который имеет происхождение из клеточной мембраны клетки хозяина. Из нее выступают шипы двух типов:

1) gp 120 (обладает рецепторной функцией);

2) gp 41 (обладает якорной функцией).

В эту мембрану встроены рецепторные образования. Под наружной оболочкой располагается сердцевина вируса (кор), которая имеет форму усеченного конуса. Промежуток между наружной вирусной мембраной и сердцевиной вируса заполнен матриксным белком. Внутри сердцевины располагаются две одинаковые молекулы вирусной РНК, связанные с низкомолекулярными белками р6 и р7.

Каждая молекула РНК содержит девять генов ВИЧ:

1) структурные (три гена);

2) регуляторные (три гена, они не кодируют структурных компонентов вируса, но, попав в клетку, кодируют образование веществ, которые либо угнетают активность структурных генов, либо активируют);

3) дополнительные (три гена, они содержат информацию, необходимую для продукции белков, которые управляют способностью вируса инфицировать клетку, реплицироваться и вызывать заболевание).

Выделяют три группы структурных генов:

1) gag (кодируют образование структурных белков сердцевины вируса);

2) pol (направляют синтез белков – вирусных ферментов);

3) ent (кодируют синтез оболочечных белков gp 120 и gp 41).

Концы каждой молекулы РНК содержат дублированную последовательность РНК. Эти участки действуют как переключатели для управления процессом вирусной транскрипции, взаимодействуя с белками ВИЧ или белками клетки хозяина.

Кроме РНК, там же находятся вирусные ферменты:

1) обратная транскриптаза; осуществляет синтез вирусной ДНК с молекулы вирусной РНК;

2) протеаза; участвует в «нарезании» предшественников вирусных белков при созревании новой вирусной частицы;

3) эндонуклеаза (интеграза); производит встраивание вирусной ДНК в геном клетки хозяина, в результате чего образуется провирус.

Антигенными свойствами обладают:

1) белки сердцевины;

2) оболочечные гликопротеины. Характеризуются высоким уровнем антигенной изменчивости, который определяется высокой скоростью замен нуклеотидов.

Интенсивная антигенная изменчивость ВИЧ происходит в организме больных в ходе инфекции и у вирусоносителей. Она дает возможность вирусу «скрыться» от специфических антител и факторов клеточного иммунитета, что приводит к хронизации инфекции.

В обычных культурах клеток ВИЧ не культивируется. Для культивирования используется культура Т-лимфоцитов с хелперной функцией.