Не выделяют уреазу (отрицательная проба Закса – ферментация мочевины).

Дифтерия – острое инфекционное заболевание, вызываемое токсигенными коринебактериями. Характеризуется характерным фибринозным (дифтерическим) воспалением слизистых зева, гортани, трахеи, реже других органов, явлениями синдрома общей интоксикации с преимущественным поражением надпочечников, ССС и периферических нервов.Входные ворота инфекции – слизистые оболочки носоглотки, реже конъюнктива, раневая поверхность. Патогенез: у входных ворот развивается фибринозное воспаление (возможно образование язв), образуется плотно спаянный с подлежащими тканями налёт (образуется жёлто-серая псевдомембрана, состоящая из бактерий, некротизированной ткани, фагоцитов, фибрина, с трудом отделяется, после этого «кровяная роса»), возникают регионарные лимфадениты. Воспаление сопровождается значительной интоксикацией, токсин распространяется гематогенным и лимфогенным путем, поражаются паренхиматозные органы, ССС и ЦНС. При дифтерии зева может возникнуть отёк слизистых гортани и голосовых связок, что приводит к асфиксии (удушью) → смерть. Особенно Дифтерия зева и гортани может быть причиной крупа и асфиксии. Наиболее распространена дифтерия зева. Клинические формы дифтерии зева:1. Локализованная (ограниченный очаг поражений, фибринозный налёт на бледных миндалинах, зеве, интоксикация слабо выражена, невысокая температура). 2. Генерализованная (вовлекаются другие органы и ткани, налёты выходят за пределы очага поражения, выражена интоксикация, температура высокая, болезненные лимфоузлы). 3. Токсическая (бурное начало, температура очень высокая, интоксикация резко выражена, толстый гнойный налёт на миндалинах, при снятии которого они начинают кровоточить, отёк тканей, поражаются ССС, ЦНС, паренхиматозные органы, летальность высокая). 4. Гипертоксическая форма (поражаются миокард, почки, надпочечники, ЦНС, выражена интоксикация, смерть может наступить в течение суток).

Эпидемиология:чаще болеют дети,у взрослых дифтерия протекает тяжело.сОНИ ПЕРЕНОСЯТ ВЫСУШИВАНИЕ

Лаборат.диагностика:Материал: слизь из зева, носоглотки, ротоглотки, носа, плёнка из очагов поражения (окрашивают по Нейссеру, корифосфином, метиленовым синим). Взятие материала осуществляют с помощью стерильных ватных тампонов. Тампоны должны быть доставлены в лабораторию не позднее 3 часов с момента взятия материала. 3. Бактериологический метод. Материал засевают на сывороточные среды, селективные среды, кровяной агар). Серодиагностика. Используют при стёртых формах для ретроспективной диагностики или выявление неуммунной прослойки населения (РНГА, ИФА, РН токсина в культуре клеток Vero).

СТОЙКИЙ ИММУНИТЕТ!

Лечение: антитоксическая противодифтерийная сыворотка применяется в ранние сроки, вводят (дробно, постепенно увеличивая дозу – 10-400 000 МЕ на курс) – профилактика анафилактического шока. Адсорбированную коклюшно-дифтерийно столбнячную вакцинц в нашей стране.+антибиотики(пенициллин,ванкомицин,эритромицин)

ВИРУСОЛОГИЯ

4. Признаки, характерные для цитопатического эффекта боль-шинства герпесвирусов:

1. Внутриядерные включения. 2. Цитоплазматические включения. 3. Апоптоз. 4. Образование симпласта. 5. Образование многоядерных кле-ток с внутриядерными включениями

Ответ:1,4,5.

Herpesoviridae(расползаться).
Три подсемейства:альфа подсем вкл род:simplexvirus тип1(нейр гангл тройн нерва) и тип2(нейр поясн гангл). Род: Varicellovirus(вир ветрян оспы)(гангл спино-мозг,тройнич,лицеев нерва) ; бетта вкл род:Cytomegalovirus,род:Roseolovirus- ГВЧ6 и ГВЧ7;гамма-вкл гвч8 и вирус энштейна-барр

Вирус Герпеса: Днк (2-нити: 2 фрагм – L-длин и S-кор). Белков капсид(икосаэдр) между капс и суперкапс тегамент(аморф вещ). Супер капсид из яд мембран и цитоплазм мемб (на ней – гликопротеидовые шипы [.gA-gE// gBCD – основные АГ). Термолабилен. Инактив при рН<4.]

Репродукция: рецетор эндоцитоз с помощ шипов – слиян с Кл – кор освоб от суперкапсида – нуклекапсид в ядро – депротеинизац ДНК, транскрипц фазная (2 ферм: тимидинкиназа, ДНК - полимераза) – трансляц – синтез около 50 вир белков (30 из них – структ/ каскадно). Стр белки идут в ядро, здесь соед-ся с геномом вир – сборка нуклеокапс – почков-е чз участк ядерн мемб,обетая при этоп суперкапсид – а)часть высвобожд из клет(продукт инфек) б)другие не заверш почков связыв с сосед клетк, начиная др цикл и образ симпласт(результ вирус-индуцир слияния контактир клеток) он не жизнеспос, при этом много клеток гибнет, внутри симпласта вирус не доступен для ат (симпласт это цитопатич эффект)

Патогенез: [В-кап, полов, Конт-быт (со слюн). Стоматит – лимф пути – кровь – генерализ (менингит, энцефалит). Пожизн персист в нейронах чув гангл-в (2-х нитч ДНК кольцом).

2 типа вир: 1. герпес губ, стоматит, конъюнктив, менингоэнцефалит 2. половой г, г новорожд-х, рак ш матки]. Первичн контамин(чаще бессимптом, мб первичн патология, мб латентная персистенц,кот может перейти в эндоген рецедив(в результ срыва контролир мех хозяина(уф-излучен,инфекции,высок или низк темпер,гормон или эмоцион нагрузки)

Им-т:IGA – в крови, но не защ-т. (лат инфекц+ обострен). Диагн: окр Роман-Гимзе (гиг многояд Кл – с внутрияд вкл). Выделение (кур эмбр на 12 день заражают, оспины через 2 дня). Мыши- сосунки (в мозг, умир через 2 дня). ИФ, РН (идентиф).

Леч-е (индуктор ИФ, вакц убитая герпетическая)

Положения для гепес: патогенетич многол-ть(проявление-от безобид губн лихорадки до генерализован форм, врожден уродств, возможн опухоли), сходво взаим с хозяин. Общая репликат стратегия, выс степ автономии от клет хозяина(см.ниже).Мех-м персист-и:неинтегратив вирогения(те не встраив в геном хозяина,сохрв клетк в виде кольцевид ДНК, автономно от хромосом), лимитиров-ая экспресс вирус генома(в клетк вирус не размнож в латент фазе,тк транскрипц его генов сдесь заблокирована:экспрессируются лишь огранич число вирусов гена,продукты кот сдерживают активность вирус ДНК =>), <= саморегуляц экспресс вир генома. Для генома хар-но:фазн-ть транскрипц, выс ген емкость(это позволяет синтезировать 70-100 белков, из котор не менее половины относ к неконструктивные(они участв в репродук вируса)а остольн структурн,те вкл в состав вириона), относ автономия от Кл –хоз(широкий набор вирусоспецеф ферментов, исключает возможность ее репликации клеточ ДНК-полимеразой:для этого вирусы польз своим ферментом). Ме-хмы патогенеза: лат персист-я, реактив-я, образов симпластов .Исходы зараж ветр оспы: клин знач инфекция, вирус персистенц(в ганглиях спинно-мозгов, тройнич, лицевог нерва). Исход герп 1 типа: ран детство(в первые 6мес ребенок защищенматеринск ат), зав вирус персист(в гангл тройн нерва), м иметь клин проявл(редко проявл,у детей: молочница, афтозный гингивостоматит(протекает доброкачественно). Цитопат эф-т: внутрияд вкл, обр-е многояд Кл, симпласт.

билет № 44.

ОБЩАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ

1. Микробиологический анализ как основа лабораторной диагностики инфекционных заболеваний. Принципы и основные методы.

Культуральн.метод-выдел-е и накопл-е чистой культуры бак-ий с ее послед. Идентиф-ей.Некот.бак-ии обл-ют а\б резистент-ю,поэтому бак.анализ может включать определения чувствительности выделения чистой культуры к а\б.

Особ-ть: многоэтап-ть. Минус- длительность-необходимо 2-3 дня иногда больше для полной идентификации микроорганизма.

Иссл.ж-ти: крови, мочи, спинномозговой жидкости, слизи из зева и носа, кала

Для выдел-я используется плотные питательные среды: специальные (для бактерий не растущих на простых средах;они содержат специал питател вещества,которые удовлетворяют пищевые потребности бактерий,+добавляют кровь,сыворотка,яйца,витамины.Пример этих сред:кровяной и сывороточный агар,сахарный бульон); селективные ( для избирательного выделения и накопления микробов определенного вида из материала,содержащих разную микрофлору.НАприме: желточно-солевой агар для выращивания стафилококков, желчный бульон-для сальмонелла тифи, щелочной бульон-для вибриона холеры); дифферениальные среды(для разделения микробов по способности расщеплять субстраты,входящих в состав питательных сред.Пример:среды Гисса-набор жидких сред с разными углеводами для изучения сахаролитической активности бактерий. Если микроб разлагает определ субстрат до кислоты- меняется рН среды и индикатор изменит цвет среды).

Время культивирования зависит от микроба,обычно формируют через 18-24 часа,потом Методы предварительной класиф-ии:

1)морфологический анализ бак.колоний и их хар-ка на спец\дифференциальн.средах

2)микроскопия окрашенных бактерий(окрашивание по методу грамма)

Для окончат.индетификации бак-ий: изуч-е биохимической акт-ти (биотипирование);-обнаруж-е бактериальных АГ (серотипирование)-1)р-ция агглютинация на стекле. Плюсы метода:простота постановки и быстрое получеение результата. Используют при серотипирование энтеробактерий

2)иммуннодиффузия в агаре-для выявления способности штаммов коринебактерий дифтерии к токсинообразованию.

3)опр-е чув-ти к бактериофагам (фаготипир-е),например,золотистый стафилококк мб идентифицирован на основе чувствительности к лизогенным бактериофагам. Для этого на чашку с засеяянной культорой стафилококка наносят различные фаги. После инкубации в термостате в люычных условиях, определяют фаготип стафилококка по наличию негативных пятен)зоны просветвления на фоне сплошного роста культуры) с помощью трафаретов с цифровыми обозначниями фага.

Экспресс-диаг-ка основана наобнаруж-и бак-ий или их комп-тов непосред-но в клин.матреиале,не требует выдел-я чист.культуры.

1)микроскоп-я-быстро,но исп-ся для идентиф-и огранич. Числа м\о

2)обнаруж-е бактериальных Аг непосред-но в материале от б-ного с исп-ем иммунохим тестов,пр.:латекс-агглютинация для обнаруж-я нейсерии menengitidis в цереброспинальной жидкости

3)газово-жидкостная хроматография-для обруж-я жирн.к-т,комп-тов клет.стенки или бак.токсинов,пр. для пат.клостридий

4)обнаруж-е опред.послед-тей нукл.к-т в исслед.материале(методы гибридиз-и ДНК,РНК; метод ПЦР)

Иммунолог. метод (серологический) вкл-ет классич. Серодиаг-ку, основ. на опр-ии Ат к выявл. или предполаг. Возб-лю. И Аллергодиаг-ку,основанную на выявл-и сенсибил-и у пациента к бак.Аг в ходе инф-ии

ИММУНОЛОГИЯ

Главный комплекс гистосовместимости (MHC/HLA). MHC/HLA-рестрикция иммунного ответа.

Антигены, определяющие реакцию отторжения аллогенного/ксеногенного трансплантанта после пересадки, относят к главным антигенам гистосовмести-мости.

Они кодируются генами 6-й хромосомы (короткое плечо), которая известна как главный комплекс гистосовместимости (ГКГЧ) – МНС. МНС есть у всех млекопитающих и птиц. Лишь малая часть МНС(HLA) - области кодирует антигены гистосовместимости.

Главный комплекс гистосовместимости человека имеет аббревиатуру HLA), т.к. впервые были обнаружены на лейкоцитах человека в реакциях с сыворотками от многорожавших женщин (так как плод на 1/2 чужеродный) и больных, получавших многократные гемотрансфузии.

HLA-I		HLA-II
1. Строение молекул (структурная организация)
Гетеродимер, состоит из 2 полипептидных цепей -- тяжелой (α-цепь) (46 кД) и легкой (β)(12 кД). Только тяжелая субъединица является продуктом главного комплекса гистосовместимости. Цепь α пронизывает плазматическую мембрану и имеет 3внеклеточных домена – α1, α2 и α3. α1 и α2 домены составляют вариабельный участок - связывается с фрагментами антигена, домен α3 лишен полиморфизма. Легкая (β) цепь представлена β2-микроглобулином. Это продукт гена, который локализован на хромосоме 15 и не входит в состав комплекса HLA. β2-микроглобулин генетически однороден и напрямую не участвует в реализации функций HLA-I. Роль транспорт α-цепи на поверхность клетки. Микроглобулин β2 не имеет трансмембранного участка, удерживаясь на мембране за счет нековалентной связи с α3-доменом. β2-микроглобулин легко сбрасывается с клетки, и его определение в крови и моче используется в диагностике некоторых (прежде всего гематологических) заболеваний.			Две нековалентно связанные пептидные цепи примерно одинакового размера – α (35 кД) и β (28 кД). Обе они являются продуктами главного комплекса гистосовместимости. Каждая из них содержит два домена (α1-α2 и β1-β2), которые прочно фиксированы на клетках при помощи трансмембранного участка молекулы. α1 и β1 домены составляют вариабельный участок - связывается с фрагментами антигена. α2 и β2 домены не имеют аллотипов.
2. Подклассы
А, В и С		DR, DQ и DP
3. Количество аллельных вариантов (Они обозначаются цифрами, которые добавляются к буквенному обозначению подкласса (например, А1, В27, С8)). Молекулы отличаются полиморфизмом
Общее число аллельных вариантов длягенов HLA-I приближается к 400 (HLA-A – 108, HLA-B – 223, HLA-C – 67). Количество известных HLA-1 антигеновменьше – около 100 (HLA-A – 28, HLA-B – 61, HLA-C –10).		Наиболее полиморфны геныHLA-IIβ-цепей: они представлены 367аллельными вариантами (DR – 249, DQ – 36, DP – 82). Гены α-цепей гораздо однороднее – 36 разновидностей (DR – 3, DQ – 20, DP – 13). В связи с доминированием полиморфизма В(β)-генов в цифровой формуле молекул II класса обычно указываются разновидности только β-цепей (например, DR4,8/DQ1,6/DP5).
комплекс включает около 800 аллелей, а каждый человек наследует около 20аллельных генов. Благодаря столь малой выборке (20 из 800) вероятность полного совпадения индивидуальных HLA-генотипов ничтожно мала. Средняя вероятность полной MHC (HLA)-идентичности двух произвольно взятых людей приближается к 1 на 1 000 000 . Совпадение возможно лишь по отдельным аллелям или их комбинациям.
4. Тканевое распределение (на поверхности, каких клеток экспрессируются)
на поверхности всех типов клеток, кроме: 1. эритроцитов, 2. нейронов и  ворсинчатого трофобласта	постоянно экпрессируются только на конститутивнопрофессиональных антигенпредставляющих клетках (АПК):1.дендритные клетки, клетки Лангерганса,                       2. макрофаги,                       3. В-лимфоциты. Появление HLA-II на других клетках говорит об их активации, т.е. является индуцибельным
5. Функции(вспомнить мышь) 1. Главное назначение системы МНС – в представлении антигенов Т-лимфоцитам
Физиологическая функция HLA-I -представление антигена клеткам, содержащим CD8рецепторы - это cTL (Т-киллеры)	Физиологическая функция HLA-IIпредставление антигена клеткам, содержащим CD4 рецепторы – это Т - хелперы Экспрессия HLA - 2 не постоянна, зависит от функционального состояния клеток и тем самым определеляет интесивность иммунного ответа (на этапе индукции Т-зависимого иммунного ответа)
2. Контроль антигеннезависимой селекции Т-лимфоцитов (позитивная и негативная)
3.Отторжение трансплантатов.Отторжение чужеродных тканей - это искусственная ситуация и ничего не говорит о физиологических функциях МНС. Близость HLA-фенотипов повышает вероятность приживления тканей в аллогенных парах «донор-реципиент».
4.Определяют предрасположенность к ряду болезней у лиц с определенным HLA-фенотипом анкилозирующий спондилит (болезнь Бехтерева): около 90% больных являются носителями гена В27. Допускают, что молекулы этого аллотипа могут быть рецептором неизвестного вируса или избирательно представлять патогенетически значимые пептиды CD8 T-лимфоцитам.

Наследование генов HLA

Из случайной комбинации складывается МНС-фенотип, присущий только данному организму, что и определяет его антигенную индивидуальность. Так, комплекс HLA генов включает около 800 аллелей, а каждый человек наследует около 20 аллельных генов.

В генотипе каждого человека имеется 6 генов HLA-I – по три в каждом гаплотипе. При несовпадении материнского и отцовского гаплотипов по генам всех трех локусов (А, В и С) индивид будет иметь наиболее полный HLA-фенотип, т.е. шесть аллотипи-ческих вариантов HLA-I (например, А4,14; В2,31; С4,10).Если гаплотипы частично дублируют друг друга, набор молекул HLA-I будет редуцирован (например, А4; В2,44; С6).

Полиморфизм увеличивается, поскольку клетка содержит диплоидный набор МНС-генов один - на "материнской", другой - и на "отцовской" хромосоме. МНС-гаплотипы (набор генов одной хромосомы) кодоминантны, т.е. одинаково влияют на фенотип клеток.

В генотипе каждого человека имеется 12 экспрессируемых генов HLA-II – шесть в каждом гаплотипе (по три гена для α (DRA, DQA, DPA) и β (DRB, DQB, DPB) цепей).

Близость HLA-фенотипов повышает вероятность приживления тканей в аллогенных парах «донор-реципиент», но препятствует нормальному вынашиванию беременности.

2. Кооперация Т-хелперов с дендритными клетками и макро-фагами включает:

1. HLA-1 зависимое представление антигенов. 2. HLA-2 зависимое представление антигенов. 3. Комплементарность между HLA-2 и CD4. 4. Комплементарность между HLA-1 и CD8. 5. Двойное распознавание ан-тигенов.

Ответ: 2,3,5.

Принципы активации Т и В –лимфоцитов в хооде иммуногенезе:

Механизмы активации лимфоцитов на этап индукции:

1. первичный стимулирующий сигнал

· двойное распознавание антигена Т-лимфоцитами, или

· распознавание свободного антигена В-лимфоцитами.

2. костимулирующие сигналы для усиления адгезии и формирования пол-ного сигнала: - комплементарные пары CD-молекул (молекулы контактного взаимодействия), - растворимые медиаторы – цитокины.

1. Активация СД 4 Т-лимфоцита (см рисунок и рисуй!)

Т-хелпер-центральная клетка в индукции ИО.

- Первичный сигнал для активации – это двойное распознавание антигена в комплексе с HLA-II на поверхности профессиональной АПК (1) - HLA-II зави-симое представление АГ.

- Костимулирующие сигналы (СД молекулы (2) и цитокины от АПК- ИЛ-1 (3))

- Затем CD4 начинает синтезировать IL-2 и одновременно экспессирует ре-цепторы к IL-2 , что приводит к аутокринной активации (самоактивации) (4). После этого лимфоцит дифференцируется в Th0 - клетку способную синтези-ровать разные цитокины (5).

- Под действием сигналов, поступающих из окружающих тканей (6), Th0 проходит финальную дифференцировку в Th1 или Th2 (7). Не до конца про-активированные Th остаются клетками памяти (8).

- Отличие между Th1 и Th2 в спектре продуцируемых цитокинов. Th1 и Th2 более специализированы, чем Th0, и синтез цитокинов у них активнее.

БАКТЕРИОЛОГИЯ

3. Микробиологическая и патогенетическая сущность дифтерии:

1. Очаговая (местная) инфекция. 2. Мономолекулярная интоксика-ция. 3. Реактивная патология. 4. Генерализованная инфекция. 5. Внут-римакрофагальная инфекция.

Ответ:1,2.

ДИФТЕРИЯ Коринебактерии. Вид Corinebacterium diphtheriae, род Corinebacterium(булава) семейство Corynebacteriaceae отдел Firmicutes.Дифт-антропоноз заб.Неподвижные прямые или слегка изогнутые палочки. Видовой эпитет отражает характер местного патогенетического процесса(дифтиритич пленка). Гр+. Облад. Метахромазией. расположение палочек в мазке под углом друг к другу, в виде «растопыренных пальцев». Большинство видов- облигатные паразиты слизистых оболочек человека и животных. Резервуар инфекции- больной или носитель, путь передачи- воздушно-капельный. Пик заболеваемости приходится на осенне-зимние месяцы. Спор, капсулы нет. Фимбрии есть Для дифтерийной палочки характерен выраженный полиморфизм. Выделяют 3 биовара(gravis-R формы; mitis – S формы, обр тельца Ба!беша- Эрнста; intermedius). Питательные среды должны содержать рост. факт.Факул.аэроб. Хемоорганотроф Характаристический признак- цистиназная активность и не фермент сахарозу и разлагать мочевину. Образует бактериоцины. Антигенная структура: О(термолаб представлены межвидовыми аг) и К- Аг(обеспеч видов спецеф и выражен иммуногенность). Токсинообразование: экзотоксин, обеспечивает мономолекулярную специфич. интоксикацию. избирательно поражает сердечную мыш, надпочечн и периферич. Нерв. сист. Его синтезируют не все штамы бактерии, лишь лизогенные штаммы. Кодируется умеренным фагом (токс+ген) негомологичная рекомбинация, лизогения). Токсин бинарен, состоит из двух субъединиц: В-обеспечивает рецепцию(эндоцитоз), А-АДФ- рибозилтрансфераза, блокирует синтез белка(мишень ФЭ2). Токсин характеризуется бифункциональностью.. Микробиол и патоген сущн дифтирии: очаговая инф(деструкция эпител и эндетел. Гиперэксудация,подавл фагоцитоза, образ псевдомембр), мономолекуляр интоксик Патогенез поражений: входные ворота- слизистые оболочки дыхательных путей, иногда глаз, половых органов, поврежден кожн покровы. Возникает местное фибринозное воспаление. Пленка плотно спаяна с тканями- это дифтеритический тип фибринозного воспаления. Дифтерия- очаговая инфекция.