Количественная и качественная характеристика микроскопических грибов и дрожжей в почве (среда ПДС)

Микроскопические грибы - это обширная группа микроорганизмов, обладающих различными свойствами. Все они используют кислород воздуха, поэтому развиваются на поверхности продукта, давая паутинообразные разрастания. Микроскопические грибы являются редуцентами, они принимают непосредственное участие в разложении растительных и животных остатков в почве.

Дрожжи являются одноклеточными неподвижными организ­мами, относящиеся к классу аскомицеты (Ascomycetes), широко распространенными в природе: они встречаются в почве, на плодах, особенно перезрелых, и листьях растений.

Для исследования почвенных микроскопических грибов и дрожжей использовалась полная дрожжевая среда ПДС. Для учета почвенных грибов из четырех чашек Петри были выбраны чашки с разведением 10^-2 и 10^-3. 

В чашках Петри были обнаружены как дрожжи, так и микроскопические грибы. Колония грибов имела белый цвет и воздушный мицелий размером 0,5 – 1 см. 

При микрокопировании фиксированного окрашенного препарата мы увидели гриб, который относится к роду Penicillium(рис. 5), второй микропрепарат содержал дрожжи (рис. 6).

Таблица 3. Количественная и качественная характеристика микроскопических грибов и дрожжей в дерново-подзолистой почве на ПДС

Разве-дение	Число колоний	Общее число КОЕ (сред-нее из 2-х повтор-ностей)	Количество КОЕ на 1 грамм абсолютно сухой почвы (КОЕ/г)	Число коло-ний доми-нирую-щей формы	Число домини-рующих микро-организ-мов (среднее), КОЕ	Домини-рущие микро-организ-мы на 1 г. абс. сухой почвы КОЕ/г	Доминирую-щие микроорганиз-мы и их процентное содержание
10-4	37	34	1,4 * 107	11	10	4,2 * 106	30%
	30			8

Рис.4Характер роста микроорганизмов на среде ПДС

Расчеты:

Рассчитываем среднее число колоний на двух чашках Петри:

n

Масса абсолютно - сухой почвы в 1 г свежей:

Общее число КОЕ в 1 г. воздушно-сухой почвы:

N=34* 105/0.24= 1,4 * 107

Рассчитываем среднее число доминирующей колонии на двух чашках Петри:

n

Число КОЕ доминирующих форм в 1 г. воздушно-сухой почвы:

N=10*105/0.24= 4,2 * 106

Рис. 5Penicilliumsp.(x1600)Рис. 6 Дрожжи(x1600)                                  

Penicillium самые распространенные среди гифомицетов. Естественный резервуар их обитания - почва, как и аспергиллы, они наиболее часто обнаруживаются в виде плесневых налетов, состоящих в основном из конидиеносцев с конидиями, на самых разных субстратах, главным образом растительного происхождения.

4.3 Количественная и качественная характеристика аэробных азотфиксирующих бактерий

Количество аэробных азотфиксирующих бактерий Azotobacterопределяют методом обрастания комочков почвы на среде Эшби. С целью количественного учёта микроорганизмов было подсчитано число комочков, давших начало колониям и определён процент их от общего числа высеянных комочков почвы на чашку Петри.

Всего на среду Эшби было выложено по 25 комочков почвы в каждую из двух чашек Петри. Было определено наличие Az. chroococcum при микрокопировании слизи на поверхности среды. Azotobacter chroococcum - обитатель почв всех типов, кроме кислых.

Азотобактер - представитель свободноживущих азотфиксирующих микроорганизмов, в родовом названии отражена способность бактерии фиксировать азот, в видовом - способность синтезировать коричневый пигмент - chroo и образовывать кокковидные клетки - coccum).

 Рис 7. Характер роста микроорганизмов на среде Эшби

Таблица 4. Анализ обрастания комочков почвы в двух чашках Петри

Такое большое обрастание комочков почвы Azotobacter chroococcum можно объяснить, тем что почва была старой, и тем что Azotobacter chroococcum достаточно требователен к влажности почвы, а влажность сероземной почвы составила 31,6%, что оказало стимулирующее действие на его развитие.

Рисунок 8. Azotobacter chroococcum

4.4 Количественная и качественная характеристика актиномицетов, использующих минеральные формы азота, в почве (среда Ваксмана)

Актиномицеты - особая группа микроорганизмов с морфологическими особенностями бактерий и низших грибов, широко распространенная в природе. Это грамположительные аэробные бактерии, обладающие способностью к спорообразованию. У актиномицетов, растущих на плотных средах, различают субстратный и воздушный мицелий. При росте на плотных средах часть мицелия проникает в питательный субстрат, а часть развивается над субстратом.

Для того чтобы выявить микроорганизмы в исследуемом образце почвы использовалась питательная среда Ваксмана. Анализ результатов происходил на 7-е сутки. Для учета актиномицетов из четырех чашек со средой Ваксмана были выбраны две чашки с разведением 10^-5, поскольку именно на этом разведении выросло большее число колоний.

Таблица 5. Количественная и качественная характеристика микроорганизмов дерново-подзолистой почвы, использующих минеральные формы азота на среде Ваксмана

Рис.9Характер роста микроорганизмов на среде Ваксмана

Расчеты:

Рассчитываем среднее число колоний на двух чашках Петри: n

Масса абсолютно сухой почвы в 1 г свежей:

Общее число КОЕ в 1 г. воздушно-сухой почвы:

N=51*10⁵/0.24= 231 * 10⁵=2,3 * 10⁷

Рассчитываем среднее число колоний на двух чашках Петри: n

Число КОЕ доминирующих форм в 1 г. воздушно-сухой почвы:

N=42*10⁵/0.24= 173* 10⁵=1,7* 10⁷

На данной среде в разведении 10^-5 доминирующими микроорганизмами были выбраны колонии, которые имели следующие характерные культурные признаки:

1. размер колоний - 2,5 мм (среднее значение);

2. цвет колоний молочно-белый с оттенком серого форма круглая (невыпуклая);

3. край ровный;

4. поверхность гладкая с матовым блеском;

5. структура неоднородная;

6. консистенция кожистая.

Рис 10.Streptomycessp.(х1600)

Нами был сделан фиксированный препарат, окрашенный фуксином, в котором при микроскопировании были обнаружены представители семейства Streptomycetaceae - грамположительные, хемоорганогетеротрофы, аэробы. Они образуют хорошо развитый субстратный разветвленный мицелий, состоящий из нефрагментированных нитей. На субстратном мицелии формируются воздушный мицелий. Споры возникают при фрагментировании гиф воздушного мицелия, могут иметь гладкую или узорчатую поверхность.