Работа  № 1. Количественное определение аскорбиновой кислоты по Тильмансу.

Метод основан на способности аскорбиновой кислоты восстанавливать 2,6-дихлорфенолиндофенол, который в кислой среде имеет красную окраску, а при восстановлении обесцвечивается; в щелочной среде окраска синяя. Реакцию проводят в кислой среде для предотвращения разрушения витамина С.

А. Определение содержания аскорбиновой кислоты в капусте.

Отвешивают 1 г капусты на весах, растирают в cтyпкe с 2 мл 10% растворa HCl, прилиивают 8 мл дистиллироваиной воды и гомогенат фильтруют. Отмеряют в колбочку для титрования 2 мл фильтрата, добавляют 10 капель 10% раствора HCl и титруют 0,001 н раствора 2,6-дихлорфеиолиндофенола до розовой окраски, сохраняющейся в течение 30 сек.

Производят расчет содержания витамина С в 100 г капусты по формуле:

      0,088 × А × Г × 100

Х= ------------------------------- , где

                 Б × В

Х - содержание аскорбиновой кислоты в мг на 100 г продукта;

0,088- содержание аскорбиновой кислоты, мг;

А - результат титрования 0,001 н раствором 2,6-дихлорфенолиндофенолом, мл;

Б - объем экстракта, взятый на титрование, мл;

В - количество продукта, взятое для анализа, г;

Г - общее количество экстракта;

100- пepесчет на 100 г продукта.

Б. Определение витамина С в картофеле.

Отвешивают 5 г картофеля на весах, растирают в ступке с 20 каплями 10% раствора НСl (чтобы картофель не темнел), постепенно приливают 15 мл дистиллированной воды. Полученную массу сливают в колбочку для титрования, ополаскивают ступку водой, сливают ее в колбочку для титpoвания и титруют 0,001 н раствором 2,6-дихлорфенолиндофенола до розовой окраски.

Вычисляют содержание аскорбиновой кислоты по формуле, приведенной выше.

Содержание аскорбиновой кислоты в 100 г капусты составляет 25-60 мг, в 100 г шиповника 500-1500 мг, в 100 г хвои 200-400 мг, в 100 г картофеля - 1-5 мг.

В. Определение витамина C в лекарственных растениях.

Техника выполнения работы.На аптечных весах берут навески лекарственного сырья (листья крапивы, цветы тысячелистника и др.) по 0,5 г, шиповник, очищенный от семян – 0,2 г. Исследуемый материал растирают в ступке с 5 мл 2% раствора НС1. Вытяжку фильтруют через тонкий слой ваты в мерную колбу на 100 мл. Извлечение витамина С из той же навески повторяют 3 раза с 5 мл соляной кислоты, фильтруя каждый раз полученную вытяжку в ту же мерную колбу. Содержимое колбы доводят до метки дистиллированной водой. Для титрования отбирают 10 мл вытяжки в стаканчик и титруют 0,001 н раствора 2,6-дихлорфенолиндофенола до розовой окраски, сохраняющейся в течение 90 сек.

Содержание витамина С в растительном сырье (кг) производят по формуле:

0,088 ´ А ´ 100 ´ 1000
Х=                       ---------, где

10 ´ В

X – содержание аскорбиновой кислоты в мг/кг;

0,088- масса аскорбиновой кислоты, соответствующая 1 мл 0,001н раствора 2,6-ДХФИФ, мг;

А - результат титрования 0,001н раствором 2,6-дихлорфенолиндофенолом, мл;

В - навеска исследуемого материала, г;

100- разведение взятой пробы;

1000 – коэффициент пересчета на 1 кг сырья;

10 – объем жидкости, взятый на титрование, мл.

Результаты исследования оформить в виде таблицы и сделать вывод о значении исследованного растительного материала как источника витамина С. В выводе указать, целесообразно ли применение данного лекарственного растения с целью профилактики С-витаминной недостаточности.

                                                                                                             Таблица

Г. Определение содержания аскорбиновой кислоты в моче.

В колбочку отмеривают 10 мл мочи, приливают 10 мл дистиллированной воды, перемешивают, подкисляют 20 каплями 10% раствора HCl и титруют 0,001 н раствором 2,6-дихлорфенолиндофенола до розовой окраски.

Содержание аскорбиновой кислоты в моче рассчитывают по формуле:

    0,088 × A × B

X=---------------------- , где

             Б

X - содержание аскорбиновой кислоты, мг/сут.; 0,088- содержание аскорбиновой кислоты, мг;

A - результат титpoвания 0,001 н раствором 2,6-дихлорфенолиндофенола, мл;

Б - объем мочи, взятый для титрования, мл;

Б - среднее суточное количество мочи (для расчета можно принять 1500 мл).