Классификация питательных сред

Ø По консистенции: жидкие, полужидкие, плотные

Уплотнители: агар-агар (0,3-2,5%), желатин (10-15%).

Ø По происхождению: естественные (молоко, картофель), искусственные, полусинтетические синтетические

Ø По составу: простые (МПА, МПБ, овощи, молоко);

• сложные (1% глюкозы – сахарный агар, 10-20% сыворотки крови – кровяной агар и др.,).

Ø По назначению: основные (простые, сложные)

•                               специальные, в т.ч.

• элективные (селективные) - солевой МПА, щелочной МПА;

• дифференциально-диагностические (Эндо, Гисса; Плоскирева);

• консервирующие;

• обогатительные (солевой МПБ).

Агар – полисахарид, добываемый из морских водорослей определенных видов; используется для уплотнения питательных сред в бактериологии по такому же алгоритму, как в быту крахмал или желатин

Натуральные среды готовятся на основе отваров, экстрактов мяса, рыбы, овощей и др. натуральных продуктов

Простые натуральные среды представляют собой такие отвары или экстракты

Сложные натуральные среды получают путем добавления в простые натуральные среды любого вещества (красителя, сахара, антибиотика, крови и т.д.)

Синтетические питательные среды получают, смешивая чистые химические вещества (как правило, соли)

Элективные (селективные, избирательные, обогащения) питательные среды – это среды, содержащие вещества, используемые бактериями определенных видов и не благоприятствующие или даже препятствующие росту других бактерий

Дифференциально-диагностические питательные среды – это среды, позволяющие отличать одни виды бактерий от других по их ферментативной активности или культуральным свойствам

Консервирующие питательные среды – это среды, используемые, например, при доставке патологического материала в бактериологическую лабораторию – так как метаболическая активность на них бактерий сводится практически к нулю, то бактерии сохраняются, но не размножаются

Бактериологический метод диагностики.

Культуральный (бактериологический) метод исследования - совокупность способов, направленных на выделение и идентификацию чистых культур микроорганизмов (бактерий) с помощью культивирования на питательных средах.
Чистая культура - совокупность микроорганизмов одного вида. Чаще всего чистую культуру получают путем отбора и культивирования изолированной колонии (потомство одной микробной клетки).
Этапы метода:
1. Забор материала для исследования.
2. Выделение чистой культуры и ее идентификация.
3. Заключение.
Забор материала для исследования. Вид исследуемого материала зависит от цели исследования (диагностика - от больного; эпиданализ - из внешней среды, продуктов питания, больного и (или) бактерионосителя).
Выделение чистой культуры:
1. Посев материала (после предварительной микроскопии) на чашку с плотной питательной средой (лучше дифференциально-диагностической или селективной) с целью получения изолированных колоний. Производят его чаще всего методом механического разобщения. В некоторых случаях (например, кровь) материал предварительно засевают в жидкую среду обогащения с последующим пересевом на чашку с агаровой средой. Иногда до посева проводят селективную обработку материала (с учетом свойств выделяемого микроорганизма; например, обработка кислотой или щелочью для выделения устойчивых бактерий). Культивируют при температуре 37°С в течение 18-24 часов. Время культивирования для разных видов бактерий может колебаться.
2. Изучение колоний на чашке с агаром (культуральные признаки), отбор наиболее типичных; б) приготовление мазков из этих колоний с окраской (по Граму или другими методами); а) отсев остатка исследованной колонии на среду накопления и выращивание в термостате при оптимальной температуре.
3. Изучение чистоты культуры, полученной на среде накопления. С этой
целью готовят мазок, окрашивают (чаще по Граму), микроскопически изучают
морфологическую и тинкториальную однородность.
4. Идентификация чистой культуры.
Заключение. По совокупности признаков в сравнении со свойствами эталонных (типовых) штаммов указывается вид выделенного из материала микроорганизма.
Оценка метода:
достоинства: относительно высокая чувствительность и точность, возможность определить численность микробов в исследуемом материале, а также чувствительность к антибиотикам; недостатки: относительная длительность, метод дорогостоящий.

Ферменты бактерий. Классификация. Практическое использование биохимической активности микроорганизмов для видовой идентификации.

Классификация ферментов

1) Экзо-                        1) Обмена             1) Конститутивные

2) Эндо-                       2) Агрессии            2) Индуцибельные

                                                                                  (индуктивные)

По катализируемым реакциям:

Гидролазы

Оксидоредуктазы

Изомеразы

Трансферазы

Лиазы

Лигазы (синтетазы)

По разлагаемым субстратам:

Протеолитические (протеазы)

Сахаролитические (карбогидразы)

Липолитические (липазы)

Ферменты агрессии

Инвазивности

§ гиалуронидаза

§ фибринолизин

§ нейраминидаза

§ коллагеназа и др.

Агрессивности

§ лецитиназа (лицитовителлаза)

§ коагулаза

§ уреаза

§ ДНК-аза и др.