Морфология, классификация и способы обнаружения грибов.

Грибы - это эукариотные организмы. Клеточная стенка мощная, состоит из гликана, целлюлозы, хитина, белка, липидов и др. Способ питания гетеротрофный. Одноклеточные или представители ветвящихся многоклеточных форм. Микро- и макроскопических размеров. Размножение вегетативное, половое и бесполое (участками мицелия, спорами, почкованием, слиянием половых клеток-гамет). Для большинства грибов характерны наличие грибницы или мицелия. Среди них встречаются как сапрофиты, так и паразиты. Свободноживущие грибы обитают в воде, почве и воздухе. Симбиотические представители сожительствуют с водорослями (лишайники) и растениями (микоризы). Взаимоотношение грибов с организмом человека рассматривается на уровне комменсализма и паразитизма. Например, Candida albicans постоянно или временно обитают на слизистых оболочках, коже и в кишечнике человека.

Таксономия и классификация.

Царство. Fungi (Mycota)

Отдел. Eumycota (настоящие грибы)

Классы. 1. Chytridiomycetes

         2. Hyphochytridiomycetes (один патогенный возбудитель взывает микозы)

         3. Oomycetes (один патогенный возбудитель взывает микозы)

         4. Zygomycetes (род Мycor, вызывают мукороз)

         5. Ascomycetes (сумчатые грибы, дрожжи)

         6. Basidiomycetes (вызывают криптококкоз, разноцветный лишай; шляпочные грибы, большинство съедобных грибов)

         7. Deuteromycetes (многие паразиты животных, растений и человека; роды Candida, Aspergillius, Penicillius)

Грибы состоят из длинных тонких нитей-гифов, которые образуют мицелий. Низшие грибы имеют гифы без перегородок (представители классов1-4). Гифы высших грибов разделены на перегородки, которые образуют многоклеточный мицелий (представители классов 5-7). Совершенные грибы размножаются половым и бесполым путем (классы 4, 5, 6). Несовершенные грибы имеют только бесполый путь размножения (классы 1, 2, 3, 7). Бесполое размножение осуществляется почкованием или фрагментацией. Грибы, существующие, преимущественно с помощью почкующихся клеток, называются дрожжевыми (класс 5) и дрожжеподобными (класс 7). Также, бесполое размножение осуществляется с помощью эндогенных спор (у низших грибов), которые созревают в головке-спорангии, и экзогенных спор - конидий.

Микроскопические исследования грибов.

1.Окраска простыми методами: водным фуксином или метиленовым-синим.

2. Окраска мазков по Граму.

3. Приготовление препарата "раздавленная капля" из участка мицелия с плодоносящими гифами для изучения при световой микроскопии на малом и большом увеличении.

4. Для обнаружения гранул гликогена в клетке дрожжей. При приготовлении препарата "раздавленная капля" под покровное стекло вводят раствор Люголя. Гликоген окрашивается в красно-бурый цвет.

5. При микроскопии патогенных грибов, исследуемый материал помещают на предметное стекло в каплю 10-20% щелочи или спирта с глицерином и накрывают покровным стеклом. Исследуют через 20 минут.

Риккетсии. Таксономия патогенных риккетсий. Особенности размножения. Способы выявления.

Риккетсии

Риккетсии – это прокариоты, наделенные чертами сходства с вирусами.

С вирусами их роднит:

1) абсолютный внутриклеточный паразитизм;

2) невозможность культивирования на искусственных питательных средах.

Таксономия риккетсий

Царство:     Procaryota

Отдел:    Gracilicutes

Порядок:    Rickettsiales

Семейство:Rickettsiaceae

Триба:        Rickettsiaе

Род:            Rickettsia; Orientia; Bartonella; Сoxiella

Способы культивирования риккетсий

n В организме морских свинок или белых мышей.

n В организме насекомых: вшей, клещей, блох и других членистоногих.

n В желточном мешке развивающегося куриного эмбриона.

n На переживающих тканевых или клеточных культурах.

Способы обнаружения риккетсий

n Окраска по Романовскому-Гимзе. У сине-фиолетовых риккетсий цитоплазма голубая, а хроматиновые зёрна красные.

n Окраска по Здродовскому – рубиново-красные на голубом фоне цитоплазмы клетки хозяина.

n Окраска по Граму – грамотрицательны.

Располагаются внутриклеточно (цитоплазма, ядро)!

Хламидии. Таксономия патогенных риккетсий. Особенности морфологии и развития. Способы выявления.

Таксономия хламидий

Царство:     Procaryota

Отдел:    Gracilicutes

Порядок:    Chlamydiales

Семейство:Chlamydiaceae

Отличие хламидий от истинных прокариот

n Мелкие размеры элементарных телец (внеклеточных форм) – 0,3-0,6-1,5 мкм.

n Облигатный внутриклеточный паразитизм. Хламидии не имеют систем мобилизации энергии, используют АТФ клетки хозяина.

n Непрокариотный цикл размножения.

Методы обнаружения хламидий

n Окраска по Романовскому-Гимзе. Используется для определения хламидий на начальных и конечных этапах цикла. Они выглядят пурпурными на фоне голубой цитоплазмы клетки.

n Обработка мечеными флюорохромами сыворотками – метод РИФ.

n Обнаружение внутриклеточных включений в виде приядерных шапочек цитологическими методами: Туревича, Муромцева и др.

n Окраска по Граму - грамотрицательны (на практике не используется).