Нормальный:  Нв Р - примитивный , до 3 мес. гестации.

                         Нв F   - фетальный, у новорожденных до 75%

                         Нв А   - 96% -98% взросл.

                         Нв А2 -  2 – 3 %

Аномальные: около    400, обусловлены   мутацией структурных генов (Нв S -  серповидно – клеточная анемия).

Анемией   считается  клинико – гематологический синдром, характеризующийся снижением концентрации гемоглобина и в большинстве случаев количества    эритроцитов   в единице объема крови.

Нв - менее 130 г/л, эритроцитов  менее 4,0   млн. у мужчин   

Нв -  менее 120 г/л, эритроцитов    менее 3,5 млн. у женщин.

Лабораторная  диагностика    начинается с   выявления   ключевого  признака: определение снижения гемоглобина и   эритроцитов.

1.определение    количества эритроцитов - RBC:

А).  в счетной камере Горяева   с последующим   пересчетом   на  1 л   с учетом    объема   квадратов    и   разведения   крови. Трудоемкий     способ.

Б). автоматическое    определение     в    гем. анализаторе    на   основе кондуктометрического   метода  (кровь   пропускается    через   отверстие диаметром   100 мкм    между  электродами, проходящая  клетка   изменяет сопротивление между электродами, величина увеличения сопротивления зависит от   объема    эритроцитов.

2. определение концентрации гемоглобина: 

Один из самых важных лабораторных показателей для  оценки анемий. Ошибки    преаналитического   этапа:

- чрезмерное  давление,  выжимание   крови,  наличие     межклеточной жидкости, разбавляющей    пробу (ошибочно   низкая   концентрация   Нв),

- венозная    кровь – наложение    жгута   более  1 мин. (прологированный сосудистый    стаз ) - ошибочно высокая    концентрация гемоглобина,

3. недостаточное  перемешивание пробы  (сверху  слой    плазмы, на  дне - форменные    элементы)

4. липидэмия.

Аналитический этап:   унифицированный   гемоглобинцианидный   метод (основан    на   переходе   всех   форм   Нв   в одну, осуществляется   при взаимодействии с  трансформирующим   раствором  (феррицианид    калия, цианид    калия, дигидрофосфат  калия, неионный   детергент) Дигидрофосфат поддерживает     рН, детергент   усиливает   гемолиз  эр, предотвращает   мутность, ферроцианид  окисляет  все формы гемоглобина в  НвСN, имеющий красноватый цвет, интенсивность   которого прямо пропорциональна концентрации. Гемоглобинцианидный  метод   одобрен   Международным Комитетом по стандартизации  в гематологии   в  1963 г., рекомендован   в  России  (Приказ Минздрава     РФ №  960 от 5 октября 1974 г.«Об унификации клин. лаб.   методов     исследования»     п. 2.1.1.

Гемихромный     метод     определения    гемоглобина     -    новый колориметрический   метод, не содержащий  реагентов    цианистых соединений. Принцип основан на переводе всех форм Нв  в  гемихром. При    взаимодействии с    трансформирующим    раствором   -     превращение гемоглобина в  окисленную низкоспиновую форму - гемихром,     имеющую красноватый  цвет, интенсивность    которого  прямо пропорциональна % Нв.

Трансформирующий    раствор:

-  четвертичные   аммониевые основания с ПАВ:                                       т - октилфеноксиполиэтокси-этанол (Х - 100), полигидроксиаурилэтиловый эфир (Вrij – 35)

- соли жирных кислот ( С 14 – С 20) с феррицианидом калия и ЭДТА в трис  –  буфере,

- натрий  додецилсульфат (SDS);

- др. агенты, не содержащие цианидов.

Из  вышеперечисленных лучшим    является SDS. Полное превращение гемоглобина в течение  5 мин. Достоинства - стабильность, длина   волны 540 нм, широкий диапазон концентраций, устойчив в течение 1,5 лет, калибровочный раствор, трансформирующий реагент не ядовит, безвреден.

Норма гемоглобина    для   мужчин    130 -160  г/л, женщин 120 - 140   г/л, подвержена физиологическим колебаниям: С 17.00 вечера и до 7.00 утра, после еды - ↓% Нв на 10%, взятие крови в положении  лежа -↓Нв на 6%.

Патология: ↓ Нв  при   анемиях, разведении крови (гипергидратация), у ку-рильщиков, т.к. в крови присутствует НвСО, не способный к    трансфор-мации в гемоглобинцианид или гемихром.

7.Степень регенераторности костного мозга -   оценка  по    количеству ретикулоцитов. 

Ретикулоциты - молодые  эритроциты  после  потери ядер,  в  крови существуют   24 час.   и   превращаются в зрелые эритроциты.   Отражают  эритропоэтическую    активность   костного   мозга. Имеет значение ретикулоцитоз (гемолитические кризы, начало лечения анемий с дефицитом вит. В – 12) .Характерной  особенностью  является  присутствие   в   цитоплазме зернисто – сетчатой    субстанции  (агрегированные рибосомы, митохондрии). Выявляется     при    суправитальной     окраске    без    фиксации  препаратов. Норма 2 – 12 ‰, после покраски  эритроциты  окрашены  в желто - зеленый цвет, зернисто – сетчатая  субстанция -  синевато фиолетовый. Количество    ретикулоцитов    выражают    на    100 эр. (%)  или на   1000 эр. (промили). Ретикулоциты имеют размеры 7,7 – 8,5 мкм.

Методы: 1.подсчет  количества ретикулоцитов при микроскопии мазков крови. Мазки крови окрашиваются суправитально методом (без предварительной фиксации) бриллиантовым крезиловым синим. Азуром 1или азуром 2.

2. автоматические методы  анализа  и  подсчета  с  применением гем. анализаторов на 38 параметров.

- абс. количество,

-индекс созревания ( нужен для оценки ретикулоцитоза. При анемиях  нормальный.

-средний объем ретикулоцитов,

- разделение на 3 класса зрелости.

9.Лабораторная оценка показателей обмена железа  –

позволяет   выявить  изменения    на   ранних стадиях, дает   возможность разграничить различные    гипохромные    анемии.

Сывороточное   железо  -  основное  количество   железа   связано с трансферрином    (Fе 3+). Определение     железа      сыворотки      дает представление    об    уровне  транспортируемого   железа. Рекомендации преаналитического   этапа: определять   до   начала   лечения или   не  ранее, чем   через    7 дней    после отмены, до переливания крови, забор крови  в утренние часы, при воспалении концентрация  снижается. 

Норма: -  мужчины - 9,0 – 28,0 мкмоль /л,

          - женщины  – 7,0 – 27,0 мкмоль/л.

Снижение - железодефицит, перераспределение железа при    острых, хронических   воспалениях;

 повышение -  нарушения  синтеза    гема или глобина,   наследственный, приобретенный дефицит трансферрина,  разрушение     клеток печени.

Общая   железо - связывающая    способность  – тест,   характеризующий способность    сыворотки    насыщаться железом.

В норме   44,8 – 71,6 мкмоль/л.

↓  - неиспользование   железа (нарушение    синтеза    гема), повреждение клеток печени, печеночно – клеточная недостаточности, перераспределение  железа    при   воспалении, патология почек   с повреждением    клубочкового   фильтра.

↑ - железо – дефицит,   беременность.

Трансферрин –норма  2,0 - 4,0 г/л (23 -  45 мкмоль/л),снижается  при    хр.   воспалении, гемахроматозе, циррозе печени,  злокач.  новообразованиях.

 ↑ - дефицит   железа, применение   оральных     контрацептивов.