КРИТЕРИИ ЭТИОЛОГИЧЕСКОЙ РОЛИ ВЫДЕЛЕННЫХ КУЛЬТУР

Критерии факультативно-патогенных микроорганизмов как этиологического фактора инфекционного процесса сложны и малонадежны. К их числу можно отнести:

1. Выделение возбудителя из стерильного материала: крови, спинномозговой жидкости. При других нозологических формах этот критерий самостоятельного значения не имеет, если даже выделена монокультура. Отрицательный результат не является основанием для утверждения, что отсутствует инфекционная природа болезни. В этих случаях инфекционная природа устанавливается на основе клинических данных.

Кровь и ликвор - достаточно выделить возбудителя.

2. Численность популяции выделенного микроба в пораженном органе по критическому числу (N). Оно рассчитывается на 1 мл исследуемого материала.

10⁵кл/мл и выше для бактерий;

10³-10⁴кл/мл для грибов и простейших.

Этому критерию принадлежит решающее значение при диагностике оппортунистических инфекций.

Следует помнить, что инфицирующая доза является производной от:

а) степени патогенности микроорганизмов;

б) уровня восприимчивости человека.

Критическая доза может быть значительно меньше и значительно больше N, так как численность популяции возбудителя меняется в процессе болезни: она снижается при переходе в хроническую форму, в период выздоровления и ремиссии, в период химиотерапии, в присутствии конкурента. В случае выделения из исследуемого материала нескольких видов или вариантов микроорганизмов в оценке этиологической роли важное значение имеет:

а) установление количественных соотношений ассоциантов,

б) за ведущего возбудителя принимают доминирующую популяцию.

3. В сомнительных случаях (микробная контаминация материала) необходимо повторное исследование этого же материала через 12-24 часов. Вывод о этиологической роли возбудителя (кровь, моча, спинномозговая жидкость, пунктаты).

4. Принадлежность выделенной культуры к больничному штамму или эковару.

5. Обнаружение у микроорганизмов факторов патогенности. Чем большее число их определяется, тем выше ценность критерия.

К сожалению, методы определения многих факторов патогенности и особенно их активности отсутствуют или долговременны, что снижает возможности использования этого критерия. Отсутствие специфических факторов патогенности не является основанием считать, что выделенному микроорганизму не принадлежит этиологическая роль, так как его патогенность может быть связана с его эндотоксином.

6. Нарастание в 4 и более раз титра антител в сыворотке крови больного к аутокультуре.

7. Выявление корреляционной связи между чувствительностью культуры к лекарственным препаратам и эффективностью лечения.

8. Выделение идентичных культур от группы больных (в случае внутрибольничной вспышки инфекции).

9. Наличие прямой корреляции между клиническим улучшением состояния больного и уменьшением массивности или полной элиминации микробов из организма больного. Основное значение имеют 1-й и 2-й критерии.

Наличие остальных критериев подтверждает этиологическую роль выделенных возбудителей, а отсутствие не исключает роли выделенных микроорганизмов в возникновении болезни.

ГНОЙНО-ВОСПАЛИТЕЛЬНЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ КОЖИ И ПОДКОЖНОЙ КЛЕТЧАТКИ

Гной 10¹   - 10⁶

В случае монокультуры:

Из закрытых очагов - < 10³

При открытых процессах <10⁵ - 10⁶

Если выделено 2 -3 культуры - смешанная этиология, то устанавливают доминирующий фактор.

Дополнительные критерии:

1) повторное выделение возбудителей из исследуемого материала через 24 часа или меньшее время;

2) обнаружение факторов патогенности;

3) принадлежность к госпитальным штаммам.

Состав микрофлоры при открытии и вскрытии закрытых очагов меняется через 5 - 7 дней.

БАКТЕРИЕМИЯ, СЕПСИС.

Гемокультура.

Культуры из первичных и вторичных очагов.

Вероятность выделения возрастает:

а) при увеличении дозы посева,      

б) при накоплении культуры в жидкой среде 1:5, 1:10

Повторные исследования: при острых процессах 2-3 раза, хронических - 5-6 раз.

Уничтожает действие антибиотиков - пенициллиназы, сульфаниламидов -парааминобензойная кислота. 5-10 мл. в колбы с 50-100 мл сахарной среды, тиогликолевой среды, Китта-Тароцци.

10 дней - 37⁰С

Повторное выделение культуры из крови

ОСТРЫЕ И ХРОНИЧЕСКИЕ НЕСПЕЦИФИЧЕСКИЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ ЛЕГКИХ

Комочки гноя, мокроты отмывают в физиологическом растворе или центрифугируют.

Мокроту гомогенизируют не 10^-1 - 10^-6 засевают по одной капле (0,05 мл).

Стрептококк > 10⁶

Cтафилококк>10⁵

Энтеробактерии>10⁴

Кандиды> 10³

Микробные ассоциации на порядок ниже.

Дополнительно:

1) повторные исследование с выделением культур.

2) нарастание титра антител

3) факторы патогенности

4) повторное исследование через 5-7 дней (смена возбудителя).

УРОИНФЕКЦИЯ, БЕССИМПТОМНАЯ БАКТЕРИУРИЯ

1) 2-х кратное количественное изучение мочи.

1) 10^-2 - 10^-4 - 10^-6 = 0,05 мл засевают капельным методом на участки

питательной среды чашки Петри.

2) КОЕ/мл. Сопоставляют результат 2-х посевов.

3) Количественный критерий ведущий.

10⁶ - 10⁸ указывает на этиологическое значение. Величина 10⁵ в большинстве случаев рассматривается также этиологическизначимой. N= 10^{4 -}  у здоровых людей. Используют дополнительные критерии.

Бессимптомная бактериурия

Источник попадания микроорганизмов в мочу исследуют: кровь, материал из других очагов локализации инфекции.

КОЕ >10⁵ /мл

Используют ускоренные методы, основанные на накоплении продуктов жизнедеятельности в моче и изменении их в присутствии редоксиндикаторов-трифенилтетрахолитхлорид (изменение цвета >10⁸ мл).

ДИСБИОЗ

1) в повторных исследованиях через 5-7 дней

10-²-10-⁴-10-⁶=0.05 мл на сектора чашки

среда Левина, бромтимоловый МПА, желчно-кровяной МПА (энтерококк), кровяной МПА (стрептококк, гемолизирующие штаммы), МПА с фурагином (Ps. aerogenosa), МРС-2 – лактобактерии, среда Блаурокка – бифидобактерии, КАБ – бактероиды, Сабуро - грибы

1) фоновые культуры

2) нехарактерные для данного биотопа КОЕ/г

3) сопоставляют с нормой

Диагноз на основе:

1) резкого снижения нормы микрофлоры

бифидобактерии и бактероиды <10⁷/г

2) резкое увеличение бактерий рода Proteus - КОЕ до 10⁵/г

клебсиеллы

псевдомонады

стафилококк

кандиды

3) увеличение удельного веса

лактозоотрицательных> 5,0-10%

гемолитических E. coli

ДИСБАКТЕРИОЗ ПОЛОСТИ НОСА

На фоне снижения Грам (+) и Грам (-) кокков увеличение >10⁴ энтеробактерий, энтерококков, псевдомонад и других неферментирующих палочек. До 10% инкапсулированных палочек, энтеробактериальный, псевдомонадныйдисбиоз.

ПОЛОСТЬ РТА

Снижение негемолитических и гемолитических стрептококков; лактобацилл; других (+) палочек, появляются бактерии фекального происхождения, синегнойная палочка (КОЕ > 10⁴) и кандида> 10³/г.

ВЛАГАЛИЩЕ

Снижение лактобацилл-менее 10⁵/г. Стафилококк, энтеробактерии другие представители фекальной микрофлоры.

КОЖА

Мазок-отпечаток

Среда Коростелева (МПА+маннит+бромтимоловый спирт), Кровяной агар, Эндо N=n > 30-40 = 2-4/см²

ОСТРЫЕ КИШЕЧНЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ

Испражнения, рвотные массы, промывные воды желудка, пищевые продукты.

Вид материала -от клиники ОКЗ. При отсутствии шигелл, сальмонелл, иерсиний, эшерихий.

1 г в физиологическом растворе 1:10 - 15 мин

10-²-10-⁴-10-⁶=0.05 мл

КОЕ 1 г материала > 10⁶/г.

Дополнительные критерии:

повторные выделения возбудителя,

факторы патогенности,

нарастание титра антител.