Определение групп крови с помощью цоликлонов

В последнее время определение групп крови человека системы АВО проводят с помощью цоликлонов Анти-А и Анти-В (антитела моноклональные Анти-А и Анти-В), которые применяют или взамен или параллельно с поликлональными иммунными сыворотками. Моноклональные Анти-А и Анти-В антитела продуцируются двумя мышиными гибридомами и принадлежат к иммуноглобулинам класса М. Цоликлоны изготавливаются из асцитной жидкости мышей-носителей анти-А и анти-В гибридом. Технология изготовления реагента исключает возможность его контаминации патогенными для человека вирусами.

Проведение работы. Нанесите на пластину индивидуальными пипетками цоликлоны Анти-А и Анти-В по одной большой капле. Рядом с каплями антител нанесите по одной маленькой капле исследуемой крови. Наблюдайте за ходом реакции с цоликлонами визуально при лёгком покачивании пластины в течение 3 минут. Агглютинация эритроцитов с цоликлонами обычно наступает в первые 3-5 сек, но наблюдение следует вести 3 мин ввиду более позднего появления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А или В. Положительный результат выражается в агглютинации эритроцитов. При отрицательной реакции капля остаётся равномерно окрашенной в красный цвет.

Знаком плюс (+) обозначено наличие агглютинации, знаком минус (-) - отсутствие агглютинации.

Определение резус-фактора

1. На пластинку со смачиваемой поверхностью нанесите большую каплю (около 0,1 мл.) реагента. Рядом поместите маленькую каплю 0,01-0,05 мл. исследуемой крови и смешайте кровь с реагентом.

2. Реакция агглютинации начинает развиваться через 10-15 с., четко выраженная агглютинация наступает через 30-60 с.

3. По наличию или отсутствию агглютинации сделать заключение о наличии или отсутствии в эритроцитах исследуемой крови резус-агглютиногена.

Цоликлон Анти-Дпредназначен для выявления Д антигена системы резус в эритроцитах человека.

Пластинку после смешения реагента с кровью рекомендуется не сразу, а через 20-30 с., что позволяет за это время развиться более полной крупной лепестковой агглютинации.