III. Определение групп крови

Определение группы кровидонора и реципиента очень важно в клинической практике при проведении переливания крови. Для определения группы по системе АВ0 используют стандартные  гемагглютинирующие  сыворотки I , II и III групп, которые содержат соответственно агглютинины α β ,β , α Изготавливаются они из донорской крови в спец лабораториях.Используются две серии каждой группы сыворотки с титром 1:32 или используют одну серию с титром 1:64. В каплю каждой стандартной сыворотки добавляют по капле исследуемой крови( соотношение 10:1), перемешивают чистой палочкой (отдельной для каждой капли) и через некоторое время отмечают наличие или отсутствие реакции агглютинации. По мере наступления агглютинации, но не ранее чем через 2-3 минуты, в капли из смеси сыворотки и крови донора добавляют 1-2 капли изотонического раствора натрия хлорида для устранения ложной агглютинации. Наблюдение за реакцией – около 5 минут после смешения капель .Наблюдение проводится при хорошем освещении и при t от 15 – 18 С до 25 С.Если в какой-либо капле сыворотки произошла агглютинация (эритроциты склеились в комочки), следовательно донорские эритроциты содержали агглютиногены, «одноименные» с агглютининами сыворотки (А - α ,В - β ). Для подтверждения АВ (4) группы крови дополнительно подтверждается проверкой еще одной сывороткой группы АВ(4). При этом агглютинации не должно быть. Для определения группы крови применяют (для исключения ошибок) двойной набор стандартных сывороток трех групп и сыворотку IV группы. Сыворотки хранятся в холодильнике при температуре +4 °С. Перед их использованием обязательно контролируют срок годности сыворотки, она должна быть прозрачной, без хлопьев. Сыворотки содержат только агглютино- гены. 1.Определение групп крови человека по системе АВ0.Группы, к которым принадлежат стандартные сыворотки, отмечены римскими цифрами. 1 - агглютинация не произошла ни в одной сыворотке, следовательно, исследуемая кровь I группы;                                                                                2 – агглютинация произошла в сыворотке I и III групп, следовательно, исследуемая кровь II группы;                                                                                3 – агглютинация произошла в сыворотке I и II групп, следовательно, исследуемая кровь III группы;                                                                           4 – агглютинация произошла в сыворотках I , II и III групп, следовательно, исследуемая кровь IV группы.

Определение группы крови с помощью цоликлонов анти-А и анти-Б.

Используются стандартные наборы моноклональных антител ( цоликлонов ). Цоликлоны – это гибрид , образованный при слиянии опухолевой клетки –миеломы (она бесконечно делится ) и иммунным лимфоцитом ( вырабатывает антитела ). Цоликлоны –порошок красного (анти-А) и синего (анти-_В) цвета. Их разводят перед употреблением изотоническим р-м натрия хлорида.                                                                                   Техника проведения                                                                                                             Цоликлоны анти-А и анти –В наносят на белый планшет по одной белой капле(0,1 мл) под соответствующими каплями : анти-А и анти –В. Рядом с каплями антител наносятся по одной маленькой капле исследуемой крови. После перемешивания наблюдают за реакцией агглютинации в течение 2-3 мин при t 18-22С ( комнатная)