Студопедия КАТЕГОРИИ: АвтоАвтоматизацияАрхитектураАстрономияАудитБиологияБухгалтерияВоенное делоГенетикаГеографияГеологияГосударствоДомЖурналистика и СМИИзобретательствоИностранные языкиИнформатикаИскусствоИсторияКомпьютерыКулинарияКультураЛексикологияЛитератураЛогикаМаркетингМатематикаМашиностроениеМедицинаМенеджментМеталлы и СваркаМеханикаМузыкаНаселениеОбразованиеОхрана безопасности жизниОхрана ТрудаПедагогикаПолитикаПравоПриборостроениеПрограммированиеПроизводствоПромышленностьПсихологияРадиоРегилияСвязьСоциологияСпортСтандартизацияСтроительствоТехнологииТорговляТуризмФизикаФизиологияФилософияФинансыХимияХозяйствоЦеннообразованиеЧерчениеЭкологияЭконометрикаЭкономикаЭлектроникаЮриспунденкция |
ГЕНОТИПИЧЕСКАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ БАКТЕРИЙ
Мутации ― это изменения в первичной структуре ДНК, которые выражаются в наследственно закрепленной утрате или изменении какого-либо признака. Одновременно у бактерий имеются различные механизмы репарации мутаций, в том числе с использованием ферментов ― эндонуклеаз, лигаз, ДНК-полимеразы. Генетические рекомбинации Трансформация — форма генетической изменчивости, при которой бактерия-реципиент поглощает из внешней среды трофическим путем фрагменты ДНК бактерии-донора. Это приводит к образованию рекомбинантных бактерий, обладающих некоторыми свойствами донорских клеток. Процесс трансформации бактерий можно подразделить на несколько фаз: 1) адсорбция ДНК-донора на клетке-реципиенте; 2) проникновение ДНК внутрь клетки-реципиента; 3) соединение ДНК с гомологичным участком хромосомы реципиента с последующей рекомбинацией. Эффективность трансформации зависит от степени гомологичности ДНК донора и реципиента. Чем выше гомологичность, тем эффективнее спаривание, и тем больше образуется рекомбинантных бактерий. Межвидовая трансформация происходит гораздо реже, чем внутривидовая. Трансдукция ― перенос генетического материала от клетки-донора к клетке-реципиенту с помощью умеренного бактериофага. Фаг переносит небольшой фрагмент ДНК бактерии-донора. В результате трансдукции бактерия-реципиент приобретает новые фенотипические признаки: ферментативные свойства, устойчивость к антибиотикам, вредным воздействиям окружающей среды, вирулентность и др. При выходе бактериофага из клетки фрагмент донорской трансдуцированной ДНК остается в хромосоме клетки-реципиента, а следовательно, сохраняются и новые фенотипические признаки. Бактериофаг при трансдукции выполняет только транспортную функцию. Типы трансдукций 1. Неспецифическая трансдукция.В процессе репродукции фага в момент сборки фаговых частиц в их головку вместе с фаговой ДНК может проникнуть какой-либо фрагмент ДНК бактерии-донора. В клетки реципиентного штамма могут быть перенесены любые гены донора. Принесенный фагом фрагмент ДНК бактерии-донора способен включаться в гомологическую область ДНК клетки-реципиента путем рекомбинации. Фаги являются только переносчиком генетического материала от одних бактерий к другим. Фаговая ДНК не участвует в образовании рекомбинантов. 2. Специфическая трансдукцияосуществляется фагами, обладающими избирательной локализацией на хромосоме бактерий. Образование трансдуцирующего фага происходит путем выщепления профага из бактериальной хромосомы вместе с генами, расположенными на хромосоме клетки-донора рядом с профагом. При взаимодействии трансдуцирующих фагов с клетками реципиентного штамма происходит включение гена бактерии-донора вместе с ДНК дефектного фага в хромосому бактерии-реципиента. 3. Абортивная трансдукция. Принесенный трансдуцируемый фагом фрагмент ДНК донора не включается в хромосому клетки-реципиента, а остается в ее цитоплазме и в таком виде способен поддерживаться и проявляться фенотипически. Во время деления бактериальной клетки трансдуцированный фрагмент ДНК может передаваться только одной из двух дочерних клеток, т.е. наследоваться однолинейно и в конечном итоге утрачиваться в потомстве. Конъюгация ― однонаправленная передача генетической информации в результате непосредственного контакта между донорной и реципиентной клетками. Необходимым условием для конъюгации является наличие у бактерии-донора F-плазмиды (полового фактоpa), которая контролирует синтез половых ворсинок (sex-pili). Бактерии, имеющие F-плазмиду, называются мужскими (F+) клетками. Женские (F-) клетки не имеют этой плазмиды. Процесс конъюгации между F+ и F- клетками имеет следующие стадии: 1) установление контакта между донором и реципиентом с помощью половых ворсинок; 2) прохождение генетического материала через канал половой ворсинки от донора к реципиенту; 3) рекомбинация между донорской и реципиентной ДНК. ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ УЧЕНИЯ О ГЕНЕТИКЕ МИКРООРГАНИЗМОВ Генная инженерия в медицинской микробиологии Продукты, получаемые генно-инженерным способом с помощью рекомбинантных штаммов бактерий: · вакцины; · гормоны; · интерфероны; · цитокины. Генетические методы, применяемые в микробиологической диагностике: · процентное содержание Г+Ц бактериальном геноме; · метод молекулярной гибридизации; · полимеразная цепная реакция (ПЦР). Полимеразная цепная реакция.Цели: · обнаружение в патологическом материале конкретного вида микроорганизма без выделения чистой культуры; · идентификация микроорганизмов; · генотипирование микроорганизмов. Этапы проведения ПЦР: · выделение ДНК из патологического материала; · добавление праймеров (участки ДНК, комплементарные 3’-концам искомого гена), добавление ДНК-полимеразы и нуклеотидов; · нагревание; · расплетение ДНК на две нити; · охлаждение; · связывание праймеров с комплементарными участками искомого гена; · нуклеотиды присоединяются к 3’-концам праймеров, ДНК-полимераза достраивает вторые цепочки ДНК; · повторение циклов (30-50) – накопление (амплификация) искомого гена; · резкое нарастание (двукратное после каждого цикла) количества искомого гена; · определение продуктов ПЦР с помощью электрофореза. Лекция 5 Противомикробные мероприятия. Микробиологические основы химиотерапии бактериальных инфекций. В медицинской практике часто требуется контролировать нежелательный микробный рост, ограничивать его появление и скорость, частично или полностью уничтожать микроорганизмы во внешней среде или в живых тканях. Для этого используют физические, химические, биологические или комплексные воздействия на микроорганизмы. Эффект от таких воздействий может быть микробицидным (гибель микроорганизмов) или микробостатическим (прекращение их роста и размножения). В зависимости от характера и целей антимикробного воздействия различают: · дезинфекцию — уничтожение на абиотических объектах патогенных микробов (обеззараживание объектов); · стерилизацию — полное уничтожение на абиотических объектах жизнеспособных микроорганизмов и их спор (обеспложивание объектов); · антисептику — уничтожение или ограничение роста микроорганизмов в живых тканях; · деконтаминацию — удаление микробного загрязнения объектов до безопасного уровня; · консервацию — предотвращение роста и размножения микроорганизмов на объектах. Дезинфекция— это комплекс мероприятий, направленных на уничтожение на абиотических объектах патогенных микробов. После дезинфекции могут сохраняться споры микроорганизмов, вегетативные формы погибают. В медицине применяют физические и химические методы дезинфекции. Физические методы: · механические (вытряхивание, проветривание, влажная уборка, стирка с моющим средством); · действие высокой температуры (проглаживание утюгом, кипячение, пастеризация); · УФО (облучение бактерицидными лампами); · ультразвук. Химические методы. При дезинфекции химическим методом применяют следующие дезинфицирующие вещества: · хлорсодержащие препараты (хлорная известь, хлорамин Б, гипохлорит кальция, гипохлорит натрия) · окислители (перекись водорода, перманганат калия); · фенолы (карболовая кислота, лизол); · йод и йодофоры (иод + ПАВ); · соли тяжелых металлов (сулема, диоцид, мертиолят); · поверхностно-активные вещества — ПАВ (сульфанол); · четвертичные аммониевые соединения (мирамистин, роккал, бензалкония хлорид и др.); · спирты (70 % этанол); · формальдегид (формалин); · красители (бриллиантовый зеленый, метиленовый синий); · кислоты (салициловая, борная и др.); · альдегиды (глютаровый). Требования, предъявляемые к дезинфектантам: · эффективность; · доступность; · безопасность. В целях недопущения выработки устойчивости циркулирующих в ЛПУ микроорганизмов к дезинфицирующим средствам рекомендуется периодически (не реже чем ежеквартально) чередовать препараты, в составе которых имеются различные действующие вещества. Если позволяют условия, предпочтение следует отдавать физическому методу дезинфекции, поскольку он более прост, надежен, экологически чист и безопасен для персонала. Стерилизация — полное обеспложивание объектов, при котором уничтожаются все формы микроорганизмов (вегетативные и споры). Стерильность ― отсутствие вегетативных и споровых форм микроорганизмов на абиотических объектах, достигаемое после действия физических, химических факторов или их сочетания. Для стерилизации применяют физические и химические методы. Физические методы: · высокая температура; · ионизирующее излучение («холодная стерилизация»); · фильтрование через коллодийные фильтры. Химические методы стерилизацииприменяют для изделий, которые нельзя стерилизовать физическими методами (из-за термолабильности, конструкции). Проводится стерилизация растворами химических средств и газовая стерилизация. Стерилизация растворами химических средств. Используют различные режимы стерилизации, например 6%-й раствор перекиси водорода, экспозиция 6 ч (изделия из полимерных материалов, стекла, коррозионностойких металлов); 4,8%-й раствор первомура, экспозиция 15 мин (лигатурный шовный материал). Газовая стерилизация.Этот метод применяется для обработки оптики, сложной техники. Используют: · окись этилена; · смесь ОБ (окись этилена с бромистым метилом); · пары раствора формальдегида в этиловом спирте. |
||
Последнее изменение этой страницы: 2018-05-10; просмотров: 235. stydopedya.ru не претендует на авторское право материалов, которые вылажены, но предоставляет бесплатный доступ к ним. В случае нарушения авторского права или персональных данных напишите сюда... |